fa مقایسه روش های سنجش فعالیت آنزیم تجزیه کننده ترکیبات ارگانوفسفره با استفاده از تکنیک های اسپکتروسکوپی، FPLC و ISE بیوشیمی Biochemistry مقاله پژوهشی Research Article <p dir="RTL"><strong>سابقه و هدف: </strong>امروزه تولید آنزیم های با قابلیت تجزیه ترکیبات ارگانوفسفره مثل ارگانوفسفات هیدرولاز(<span dir="LTR">OPH</span>) شناسایی از اهمیت ویژهای برخوردار است. تولید این آنزیم ها با کارایی بالا یکی از اهداف مهندسی پروتئین است. بنابراین استفاده از تکنیک های کارا برای اندازه گیری فعالیت آنزیم مهم می باشد.</p> <p dir="RTL"><strong>مواد و روش ها:</strong> در این تحقیق از تکنیک سنجش یونی<a href="#_ftn1" name="_ftnref1" title=""><span dir="LTR">[1]</span></a> جهت بررسی میزان تجزیه دی ایزوپروپیل فلوروفسفاتاز( <span dir="LTR">DFP</span> )و با تکنیک اسپکتروسکوپی و <span dir="LTR">FPLC</span> جهت سنجش میزان تجزیه دیازینون و کلرپیریفوس استفاده شد. و نتایج حاصل از این سنجش ها با هم مقایسه گردید.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته ها:</strong> تکنیک الکترود انتخابی یون فلوئور ( <span dir="LTR">ISE</span>) &nbsp;برای &nbsp;<span dir="LTR">DFP</span>روش خوبی است. در مورد کلرپیریفوس و دیازینون بدلیل تغییرات جذبی نوری محصولات حاصل از واکنش اسپکتروسکوپی روشی مناسب می باشد. روش <span dir="LTR">FPLC</span> را می توان برای اکثر سوبسترا ها استفاده نمود و روشی بهینه مطرح می گردد.</p> <p dir="RTL"><strong>بحث:</strong> در روش <span dir="LTR">FPLC</span> همه سوبسترا ها قابلیت استفاده دارند به جهت اینکه در این مورد بررسی جذب انواع نمونه ها در طول موج های مختلف با اختلاف جذب و اختلاف غلظت معنی داری&nbsp; امکان پذیر &nbsp;می باشد به همین خاطر روشی با حساسیت بالا جهت سنجش عملکرد معرفی می شود.</p> <p><strong><span dir="RTL">&nbsp;نتیجه گیری: </span></strong><span dir="RTL">انتخاب روش دقیق در بررسی عملکرد یک محصول پروتئینی در برآورد میزان کارایی روش تولید آن محصول بسیار مهم می باشد.</span></p> <div>&nbsp; <hr align="left" size="1" width="33%" > <div id="ftn1"> <p dir="RTL"><a href="#_ftnref1" name="_ftn1" title=""><span dir="LTR">[1]</span></a> : <em><span dir="LTR">ion</span></em><span dir="LTR">-</span><em><span dir="LTR">selective electrode</span></em><span dir="LTR"> (</span><em><span dir="LTR">ISE</span></em><span dir="LTR">)</span></p> </div> </div> <div dir="ltr"> <p style="text-align: justify;"><strong>Aim and Background</strong>: Nowadays in medical fields, the production of enzymes that are</p> </div> <p dir="ltr" style="text-align: justify;"></p> <div dir="ltr"> <p style="text-align: justify;">closely associated with human health has a special position in medical research. One of the environmental problems affecting human health is environmental pollution of which organophosphorus compounds (OPs) are notable. Therefore, the detoxification of OPs is important for human health. In this field, enzymes that can degrade OPs have been identified such as OPH. OPH production with a high performance is one of the goals of protein engineering. Therefore, the use of techniques applied to measure the enzyme activity is important. Several methods by using various Ops substrates can be designed.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Material and Methods</strong>: In this study, we have used ISE to assay the degradation of DFP and spectroscopy and FPLC to assay the degradation of Diazinon and Chlorpyrifos. Then, the results were compared.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Results</strong>: The results showed that ISE is a good method in case of DFP substrate due to the production of F^- ion in presence of DFP. In the case of Chlorpyrifos and diazinon spectroscopy is more appropriate due to the changes in optical absorption of the reaction products. The FPLC method is an applicable method for all substrates.</p> </div> <p dir="ltr" style="text-align: justify;"></p> <p dir="ltr" style="text-align: justify;"><strong>Conclusion</strong>: It is possible to use various substrates at different wavelengths along with a remarkable significant difference in absorption and concentration by FPLC, therefore, it is suggested as a highly sensitive method for enzyme assay.</p> ارگانوفسفات ها, سنجش فعالیت آنزیم , FPLC, اسپکتروسکوپی, ISE Organophosphates, enzyme activity assay, FPLC, Spectroscopy, ISE 33 38 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-870-2&slc_lang=fa&sid=1 SafarAli Ahmadizad e firozjaei صفرعلی احمدی زاد فیروزجائی 10031947532846006044 10031947532846006044 No 2. Applied biotechnology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران Samaneh Khodi سمانه خودی 10031947532846006045 10031947532846006045 No 2. Applied biotechnology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران AliMohammad Latify علی محمد لطیفی amlatify@yahoo.com 10031947532846006046 10031947532846006046 Yes 2. Applied biotechnology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Science, Tehran, Iran مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران Shamsozoha Abolmaali شمس الضحی ابوالمعالی 10031947532846006047 10031947532846006047 No Biotechnology Department of Cell and Molecular Biology, Faculty of Science, Semnan University, Semnan, Iran. گروه زیست شناسی، دانشکده بیوفناوری، پردیس علوم و فناوری نوین، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران