[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 2، شماره 8 - ( 7-1391 ) ::
جلد 2 شماره 8 صفحات 79-87 برگشت به فهرست نسخه ها
کلونینگ، بیان ژن وتخلیص آنزیم CEL Iاندونوکلئاز از گیاه کرفس
سولماز خلیق فرد ، مژگان بنده پور، وحید رضا یاسایی، کاظم پریور، بهرام کاظمی
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه ، واحد علوم و تحقیقات ، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران ، skhalighfard96@gmail.com
چکیده:   (23187 مشاهده)

اهداف: آنزیم I CEL یک گلیکوپروتئین گیاهی است که از گیاهان دسته کرفس استخراج می شود و اولین آنزیم یوکاریوتی است که پیوند ناجور را با یک اختصاصیت بالا در یکی از دو رشته DNA برش می دهد. هدف از این پژوهش کلون کردن ژن، بیان و تخلیص آنزیم CEL I اندونوکلئاز و بررسی عملکرد آن بر روی ژنهای جهش یافته در محیط آزمایشگاهی بوده است.

مواد و روش ها: در این تحقیق از گیاه کرفس mRNA استخراج شد و سپس RT-PCR صورت گرفت و محصول به عنوان الگودر تکثیر PCR مورد استفاده قرار گرفت. ژن در پلاسمید بیانی pET32a ساب کلون شد و درون باکتری E.coli سویه BL2I( DE3) plysS ترانسفورم گردید. پروموتور ژن با IPTG القا شد و با وسترن بلاتینگ مورد بررسی قرار گرفت. پروتئین با ستون کروماتوگرافی تمایلی ( S.Tag / His.Tag ) تخلیص شد. همچنین فعالیت اندونوکلئازی آنزیم روی محصول PCR ژن جهش یافته و نرمال در حال بررسی می باشد. 

یافته ها: کلونینگ ژن با موفقیت انجام شد، پروتئین نوترکیب تخلیص شد و نتایج اولیه نشان دادند که آنزیم می تواند نواحی هترودوبلکس ژن را شناسایی کند.

نتیجه گیری: آنزیم CEL I نوترکیب می تواند نواحی هترودوبلکس راشناسایی نماید.

واژه‌های کلیدی: آنزیم CELI اندونوکلئاز، وسترن بلاتینگ، پلاسمید pET32a، پروتئین نوترکیب، کروماتوگرافی تمایلی
متن کامل [PDF 520 kb]   (3897 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله تحقیقی | موضوع مقاله: ژنتیک
دریافت: ۱۳۹۱/۱۰/۲
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

کد امنیتی را در کادر بنویسید >


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Kaligh S, Bandehpour M, Yassaee V R, Parivar K, Kazemi B. Cloning, Expression and Purification CEL I Endonuclease Enzyme from Celery Plants. NCMBJ. 2012; 2 (8) :79-87
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-259-fa.html

خلیق فرد سولماز، بنده پور مژگان، یاسایی وحید رضا، پریور کاظم، کاظمی بهرام. کلونینگ، بیان ژن وتخلیص آنزیم CEL Iاندونوکلئاز از گیاه کرفس. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1391; 2 (8) :79-87

URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-259-fa.html



دوره 2، شماره 8 - ( 7-1391 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی New Cellular and Molecular Biotechnology Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 30 queries by YEKTAWEB 3705