دوره 16، شماره 63 - ( 5-1405 )
جلد 16 شماره 63 صفحات 54-38 |
برگشت به فهرست نسخه ها
مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی پژوهشکده فناوری های زیست پزشکی دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران
چکیده: (377 مشاهده)
زمینه و هدف: بیماریهای عفونیِ رودهای یکی از مشکلاتِ مهمِ بهداشتیِ کشورهای درحال توسعه محسوب میشوند. اشریشیاکلی آنتروتوکسیژنیک (ETEC)از عواملِ اصلیِ بروزِ اسهالِ حاد و مرگومیرِ ناشی از آن است. در این مطالعه با توجه به محدودیتهای درمانیِ این عفونت، با هدفِ طراحی و ارزیابیِ واکسن بر پایۀ پروتئین SlyB انجام شد که در شرایطِ اسیدیِ معده و محیطِ روده مقاوم بوده و تخریب نشوند.
مواد و روشها: ژنِ SlyB از سویۀ ETEC جداسازی و پس از بررسیِ بیوانفورماتیکی (BLASTn، SignalP، Oligo7، محاسبۀ CAI و GC%) در وکتورِ pET28a کلون و در E. coli BL21 (DE3) بیان شد. پروتئینِ نوترکیب با Ni-NTA تخلیص و در نانوذراتِ کیتوزان (با روشِ یونیک-ژلاسیون) کپسوله گردید. خصوصیاتِ نانوذرات با زتاسایزر مالوِرن بررسی شد. جاندارِ مدل در گروههای تزریقی، خوراکی و ترکیبی با دوزهای ۱۵۰-۳۰۰ میکروگرم ایمنسازی شد. تیترِ آنتیبادی IgG و IgA سرمی و مخاطی با ELISA غیرمستقیم اندازهگیری و آزمونِ چالشِ رودۀ بستۀ خرگوش برای ارزیابیِ خنثیسازیِ توکسینِ LT انجام گرفت. تحلیلِ آماری با SPSS و سطحِ معناداری 0/05 < p نیز صورت پذیرفت.
نتایج: بازدهیِ کپسولهسازیِ ۸۸ درصد و اندازۀ نانوذرات 116/6 نانومتر بود. نانوواکسنِ پاسخِ ایمنیِ humoral و mucosal قویتری نسبت به فرمِ خالص ایجاد کرد و در آزمونِ چالش، کاهشِ معنیدارِ تجمعِ مایعات مشاهده شد.
نتیجهگیری: در جاندارِ مدل نانوذراتِ کیتوزان حاویِ پروتئینِ نوترکیبِ SlyB پتانسیلِ بالایی برای القای ایمنیِ محافظتیِ درمقابلِ ETEC نشان داد. بنابراین کپسولهسازیِ آنتیژنها در نانوذرات میتواند بهعنوانِ راهکار مؤثر برای واکسنِ خوراکی مورداستفاده قرار گیرد.
مواد و روشها: ژنِ SlyB از سویۀ ETEC جداسازی و پس از بررسیِ بیوانفورماتیکی (BLASTn، SignalP، Oligo7، محاسبۀ CAI و GC%) در وکتورِ pET28a کلون و در E. coli BL21 (DE3) بیان شد. پروتئینِ نوترکیب با Ni-NTA تخلیص و در نانوذراتِ کیتوزان (با روشِ یونیک-ژلاسیون) کپسوله گردید. خصوصیاتِ نانوذرات با زتاسایزر مالوِرن بررسی شد. جاندارِ مدل در گروههای تزریقی، خوراکی و ترکیبی با دوزهای ۱۵۰-۳۰۰ میکروگرم ایمنسازی شد. تیترِ آنتیبادی IgG و IgA سرمی و مخاطی با ELISA غیرمستقیم اندازهگیری و آزمونِ چالشِ رودۀ بستۀ خرگوش برای ارزیابیِ خنثیسازیِ توکسینِ LT انجام گرفت. تحلیلِ آماری با SPSS و سطحِ معناداری 0/05 < p نیز صورت پذیرفت.
نتایج: بازدهیِ کپسولهسازیِ ۸۸ درصد و اندازۀ نانوذرات 116/6 نانومتر بود. نانوواکسنِ پاسخِ ایمنیِ humoral و mucosal قویتری نسبت به فرمِ خالص ایجاد کرد و در آزمونِ چالش، کاهشِ معنیدارِ تجمعِ مایعات مشاهده شد.
نتیجهگیری: در جاندارِ مدل نانوذراتِ کیتوزان حاویِ پروتئینِ نوترکیبِ SlyB پتانسیلِ بالایی برای القای ایمنیِ محافظتیِ درمقابلِ ETEC نشان داد. بنابراین کپسولهسازیِ آنتیژنها در نانوذرات میتواند بهعنوانِ راهکار مؤثر برای واکسنِ خوراکی مورداستفاده قرار گیرد.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
میکروبیولوژی
دریافت: 1405/5/9 | پذیرش: 1405/5/10 | انتشار: 1405/5/10
دریافت: 1405/5/9 | پذیرش: 1405/5/10 | انتشار: 1405/5/10
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |