سابقه وهدف: آلبومین سرم انسان از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد . این پروتئین حامل بسیاری از هورمون ها ومتابولیت ها در بدن بوده و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها مؤثر می باشد. چون تهیه آن از پلاسمای خون پرهزینه بوده و همراه با آلودگی به پاتوژن ها ی مختلف است، تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری به نظر می رسد
مواد و روش ها: ژن آلبومین سرم انسان ( HSA ) براساس توالی موجود در بانک ژن سنتز شد و بعد از کلون در وکتور pET22b به سلول پذیرای BL21 (DE3) انتقال یافت .کلنی حاوی پلاسمید نوترکیب، کشت داده شد و هنگامی که به 6/0 = 600 OD رسید، با mM 5/1 IPTG القا شد. سپس در ساعات مختلف رسوب گیری انجام شد و روی ژل 10% SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت . تولید پروتئین با روش وسترن بلات تائید گردید و تخلیص پروتئین توسط کروماتوگرافی تمایلی انجام شد.
یافته ها: دراین مطالعه آلبومین انسانی در فضای پری پلاسمیک باکتری تولید شد. بیشترین میزان پروتئین نوترکیب تولید شده ، 24 ساعت پس از القاء بو . نتیجه گیری: در این مطالعه آلبومین انسانی به صورت نوترکیب در اشرشیا کلی تولید شد.
بازنشر اطلاعات | |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |