:: دوره 3، شماره 9 - ( 11-1391 ) ::
جلد 3 شماره 9 صفحات 61-66 برگشت به فهرست نسخه ها
بیان آلبومین سرم انسانی نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی سویه (DE3) BL21
فاطمه غفاری، فرناز خیر اندیش، بهرام کاظمی، محمد داود غفاری، مژگان بنده پور
گروه بیوتکنولو‍ژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران- ایران ، bandehpour@gmail.com
چکیده:   (22345 مشاهده)

سابقه وهدف: آلبومین سرم انسان از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد . این پروتئین حامل بسیاری از هورمون ها ومتابولیت ها در بدن بوده و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها مؤثر می باشد. چون تهیه آن از پلاسمای خون پرهزینه بوده و همراه با آلودگی به پاتوژن ها ی مختلف است، تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری به نظر می رسد

 مواد و روش ها: ژن آلبومین سرم انسان ( HSA ) براساس توالی موجود در بانک ژن سنتز شد و بعد از کلون در وکتور pET22b به سلول پذیرای BL21 (DE3) انتقال یافت .کلنی حاوی پلاسمید نوترکیب، کشت داده شد و هنگامی که به 6/0 = 600 OD رسید، با mM 5/1 IPTG القا شد. سپس در ساعات مختلف رسوب گیری انجام شد و روی ژل 10% SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت . تولید پروتئین با روش وسترن بلات تائید گردید و تخلیص پروتئین توسط کروماتوگرافی تمایلی انجام شد.

یافته ها: دراین مطالعه آلبومین انسانی در فضای پری پلاسمیک باکتری تولید شد. بیشترین میزان پروتئین نوترکیب تولید شده ، 24 ساعت پس از القاء بو . نتیجه گیری: در این مطالعه آلبومین انسانی به صورت نوترکیب در اشرشیا کلی تولید شد.

واژه‌های کلیدی: آلبومین سرم انسانی، ( DE3 ) BL21، pET22b
متن کامل [PDF 1013 kb]   (4386 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله تحقیقی | موضوع مقاله: بیوشیمی
دریافت: ۱۳۹۱/۱۱/۲۸


XML   English Abstract   Print



دوره 3، شماره 9 - ( 11-1391 ) برگشت به فهرست نسخه ها