New Cellularand Molecular Biotechnology Journal

fa ﺷﻨﺎﺳﺎیﯽ اکسترموفیل‌های ﺗﻮﻟﯿﺪﮐﻨﻨﺪه آﻧﺰیﻢﻫﺎی ﺿﺪﺳﺮﻃﺎن ال- ﮔﻠﻮﺗﺎﻣﯿﻨﺎز و ال- آسپاراژیناز ازﭼﺸﻤﻪ آﺑﮕﺮم ﻻریﺠﺎن. Identification of extermophilies producing l- glutaminase and l-asparaginase from Larijanhotspring سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article سابقه و هدف: فراوانترین منابع برای بهدست آوردن آنزیمها با قابلیت پایداری بیشتر، باکتری های ترموفیل هستند. در سالهای اخیر ال- آسپاراژیناز میکروبی به طور گسترده ای در درمان سرطان های انسانی مورد استفاده قرار گرفته است. امروزه به دلیل کاربرد زیاد ال-گلوتامیناز در صنعت پزشکی از آن در درمان لوسمی حاد لنفوبلاستی و بیماری ایدز استفاده می گردد. هدف مطالعه حاضر، غربالگری سویه های ترموفیل جدید با قابلیت تولید آنزیم های ال- گلوتامیناز وال- آسپاراژیناز بود. مواد و روش ها: چشمه آبگرم لاریجان به عنوان محل جداسازی باکتریهای ترموفیل انتخاب شد. کشت و تست های مورفولوژیکی و بیوشیمیایی، انجام شد. تمام سویه های باکتریایی به منظور بررسی فعالیت آنزیمی ال- آسپاراژیناز و ال- گلوتامیناز به وسیله روش (RPA)  غربالگری شدند. محیط M9 اصلاح شده حاوی ال- آسپاراژین و ال- گلوتامین و فنل رد به عنوان معرف استفاده شدند. سویه های باکتریایی به وسیله تعیین سکانس ژن6RrRNA  بعد از PCR شناسایی شدند. یافته ها: در مجموع 6 سویه ترموفیل از چشمه آبگرم لاریجان جداسازی شدن aد که متعلقبه گونه باسیلوس لیکنی فورمیس بودند. فعالیت ال- آسپاراژیناز در سویه های LT-1,LT-2, LT-3, LT-4 ,LT -5 مشاهده شد. فعالیت ال-گلوتامینازی به وسیله باسیلوس لیکنیفورمیس سویه هایLT-1, LT-3, LT-5,LT-6 تولید شد. سه سویه ترموفیل  LT-1,LT-3,LT-5باقابلیت تولید آنزیم ال- آسپاراژیناز وال- گلوتامیناز با موفقیت جداسازی شدند. نتیجه گیری: چشمه آبگرم لاریجان یکی از منابع با پتانسیل بالای محصول های مفید میکروبی است که می تواند به عنوان یک منبع مفید محصول های متعدد بیولوژیکی همانند آنزیم ها مورد استفاده قرار گیرد. Background and Objective: The most frequently used sources of more stable enzymes are thermophilic bacteria. In recent years microbial L-asparaginase has been widely used as therapeutic agent in the treatment of human cancers. Microbial L-glutaminase is currently used in the treatment of acute lymphoblastic leukemia (ALL) and human immunodeficiency virus (HIV) because of its potential applications in medicine . The aim of present study was to screen new potent thermophilic bacterial isolates producing L-asparaginase and L-glutaminase.  Methods: Larijan hotspring was chosen as the location for isolation of the thermophilic bacteria.  Culture and morphological and biochemical tests, were performed. All the bacterial isolates were screened in ortherto L-asparaginase and L-glutaminase  enzyme  activity  using  Rapid Plate assay method. M9  modified media incorporated L-asparaginase or L-glutaminase and phenol red as indicator were used. Thermophilic strains were later identified by 16SrRNA gene ribotyping followed by PCR .  Results:  A total of six isolates recovered from Larijan hotspring were found to belong to Bacillus licheniformis. The L-asparaginase activity was observed in LT-1, LT-2, LT-3, LT-4, LT-5 strains.The L-glutaminase produced by Bacillus licheniformis LT-1, LT-3, LT-5 and LT-6 strains. Three thermophilic LT-1, LT-3, LT-5 strains with L-glutaminase and L-asparaginase activity have been successfully isolated. Conclusion: Larijan hot spring is one of the potential sources of useful microbial products that can be used as a source of useful different biological products like enzymes. باکتری‌های ترموفیل, ال- گلوتامیناز, ال-آسپاراژیناز, عامل ضدسرطان. Thermophilic bacteria, L-asparaginase, L-glutaminase, therapeutic agent 29 38 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-1290-2&slc_lang=fa&sid=1 Elham Noormohamadi الهام نورمحمدی 10031947532846008679 10031947532846008679 No Biology department, East Tehran Branch , Islamic Azad University ,Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شرق، تهران، ایران Mahnaz Farahmand مهناز فرهمند farahmand90@yahoo.com 10031947532846008680 10031947532846008680 Yes Biology department, East Tehran Branch , Islamic Azad University ,Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شرق، تهران، ایران Ahmad Reza Esmaeili Rastaghi احمدرضا اسماعیلی رستاقی 10031947532846008681 10031947532846008681 No Department of parasitology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بخش انگل شناسی، انستیتوپاستور ایران، تهران، ایران