New Cellularand Molecular Biotechnology Journal

fa تشخیص مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در مایع مفصلی بیماران مبتلا به ارتریت با استفاده از روش PCR Detection of Mycobacterium tuberculosis in synovial fluid from patients with arthritis using PCR سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article سابقه و هدف: آرتریت باکتریایی یکی از انواع آرتریتهای شناخته شده است که بهسرعت باعث تخریب مفاصل میشود. از بین باکتریهای مولد آرتریت عفونی، مایکوباکتریوم تربرکلوزیس (MTB) یکی از باکتریهایی است که میتواند بهطور نادر ایجاد کننده این عارضه باشد. هدف از این مطالعه بررسی وجود مایکوباکتریوم تربرکلوزیس در مایع مفصلی بیماران مبتلا به آرتریت از طریق روش PCR است. مواد و روشها: این مطالعه بر روی مایع مفصلی ۷۰ بیمار مراجعه کننده به بیمارستان شریعتی تهران که دچار آرتریت بوده اند صورت گرفت. DNA از مایع مفصلی این ۷۰ بیمار با روش فنل کلروفرم استخراج شد. پرایمر، برای ژن هدف IS6110 انتخاب و بعد از تأیید حساسیت و اختصاصیت، تست PCR بهینه بر روی نمونه‌ها انجام و مورد ارزیابی قرار گرفتند. یافته ها: تست PCR بهینه و آمپلیکون bp 317 بهوسیله آگاروزژل الکتروفورز %۵/۱ مشاهده گردید. حد تشخیص تست 100 و با ویژگی صد درصد ارزیابی گردید. DNA مایکوباکتریوم توبر کلوزیس در ۴ نمونه مایع مفصلی بیماران مبتلا به آرتریت (%۷/۵) دیده شد. نتیجه گیری: اولین قدم در درمان بیماری، تشخیص درست و سریع آن است. مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مشخصههایی از قبیل رشد کند دارد که شناسایی این باکتری را از طریق کشت و تستهای بیوشیمیایی مشکل و طاقت فرسا میکند. نتایج این مطالعه مؤید آرتریت‌های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس موجود است که تشخیص سریع و بهموقع آنها از طریق PCR امکان درمان صحیح آنها را مهیا مینماید.   Aim and Background: Bacterial arthritis is one of the arthritis diseases known that can rapidly cause joint damage. Among the bacteria causing septic arthritis, Mycobacterium tuberculosis (MTB) is one of those that rarely produce arthritis. The aim of this study is to examine the presence of MTB in synovial fluid of patients with arthritis using Polymerase Chain Reaction (PCR) Materials and Methods: This study was carried out on 70 synovial fluid samples gathered from Shariati Hospital. DNA was extracted using Phenol-Chloroform standard extraction technique. PCR test optimized on the basis of IS6110 target gene. Samples were analyzed by PCR test after evaluation of specificity and sensitivity of PCR. RESULT: PCR test was optimized and the 317-bp amplicon detected by 1.5% agarose gel electrophoresis. Limit of detection (LOD) was estimated as 100 copy/Reaction. MTB DNA was detected in 4 (5.7%) synovial fluid samples of patients with arthritis. CONLUSION: First step in treatment is rapid and accurate diagnosis. MTB have some characteristics including slow generation making the identification difficult and exhausting through culturing and biochemical tests that sometimes leads to ambiguous results. Results of this study confirm that MTB could play a role in bacterial arthritis and rapid diagnosis using PCR provides us with accurate treatment. آرتریت , PCR, مایکو باکتریوم تربرکلوزیس , مایع مفصلی, تشخیص Mycobacterium tuberculosis, Diagnosis, Synovial, PCR 93 101 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-1379-2&slc_lang=fa&sid=1 Pasha Talebi Charmchi پاشا طالبی چرمچی pasha64t@gmail.com 100319475328460010984 100319475328460010984 No Iranian Gene Fanavar Institute (IGF), Tehran/Iran مؤسسه ایرانیان ژن فناور (IGF)، تهران، ایران Mohammad Hassan Shahhosseiny محمدحسن شاه حسینی 100319475328460010985 100319475328460010985 Yes Department of Microbiology – Shahr-e-Qods Branch – Islamic Azad University –Iranian Gene Fanavar Institute (IGF), Tehran گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد شهر قدس ، تهران، ایران Mahsa Malekmohammadi Kalahroudi مهسا ملک محمدی کلهرودی 100319475328460010986 100319475328460010986 No Iranian Gene Fanavar Institute (IGF), Tehran/Iran مؤسسه ایرانیان ژن فناور (IGF)، تهران، ایران Hoda Kavousi هدا کاوسی 100319475328460010987 100319475328460010987 No Rheumatology Research Center- Tehran University of Medical Sciences- Tehran / Iran مرکز تحقیقات روماتولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران