fa تشخیص مولکولی هلیکوباکتر پیلوری در مایع منی مردان نابارور سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:16.0pt;">سابقه و هدف:</span></span></strong> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">عفونت</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باکتریایی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">سیستم</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تناسلی،</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">از</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">عوامل</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">شایع ناباروری</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">می</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باشند</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">یکی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">از</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مهم</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ترین</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">علت</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ناباروری</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مردان،</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">عفونت</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">های</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مایع</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">منی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مجاری</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تناسلی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">است. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">این</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">میان</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">، </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">طیف</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">وسیعی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">از</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باکتری ها،</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">با</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">درجه های</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مختلف،</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در ایجاد</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ناباروری</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مردان</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نقش</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">دارند. <em>هلیکوباکترپیلوری </em>ممکن است باعث ناباروری در مردان شود، زیرا به</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">طور</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">معنی داری آنتی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">بادی های</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ضد این</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باکتری</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مایع</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تناسلی</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">بیماران</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نابارور</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">یافت</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">شده است. هدف</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> بررسی حضور </span></span><em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">هلیکوباکترپیلوری </span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در مایع منی مردان نابارور با روش سریع مولکولی </span></span><span dir="LTR">PCR</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و تعیین درصد آن است.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:16.0pt;">مواد و روش</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:16.0pt;">ها:</span></span></strong> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">جمع آوری 100 نمونه مایع منی </span></span><span style="font-size:14.0pt;">(</span><span dir="LTR">Semen</span><span style="font-size:14.0pt;">)</span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> از بیمارستان صارم و </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">استخراج </span></span><span dir="LTR">DNA</span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> از این نمونه ها به روش </span></span><span dir="LTR">DNG_PLUS</span> <span dir="LTR">Boiling/</span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> صورت گرفت. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تست </span></span><span dir="LTR">PCR</span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> بر روی </span></span><span dir="LTR">DNA</span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> استخراج شده از نمونه ها انجام گرفت.</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">هم چنین تست بهینه شده از نظر حساسیت و اختصاصیت مورد بررسی قرار گرفت.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:16.0pt;">یافته ها:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> تست </span></span><span dir="LTR">PCR</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">بهینه</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">آمپلیکون </span></span><span dir="LTR">bp</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">294 با استفاده از پرایمر های اختصاصی </span></span><em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">هلیکوباکترپیلوری </span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تکثیر شدند. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در بررسی تست ویژگی، پرایمر ها فقط با </span></span><span dir="LTR">DNA</span> <em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">هلیکوباکترپیلوری </span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">باند ایجاد کردند و با </span></span><span dir="LTR">DNA</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">سایر میکروارگانیسم ها باندی ایجاد نشد. میزان حد تشخیص تست</span></span><span dir="LTR">Copy/reaction </span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">10 اندازه گیری شد.</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">از 100 نمونه مورد بررسی، 10 نمونه (10%) مثبت گردید.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:16.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه، <em>هلیکوباکترپیلوری </em>از عوامل باکتریایی است که ممکن است در زمینه بخشی از ناباروری آقایان در نظر گرفته شود، که البته نیاز به مطالعه بیشتری دارد. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">هم چنین روش </span></span><span dir="LTR">PCR</span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">روش مولکولی مناسب، سریع و حساس نسبت به روش های سنتی برای تشخیص </span></span><em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">هلیکوباکترپیلوری </span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در مردان نابارور است.</span></span><br> &nbsp; <strong>Aim and Background:</strong> Bacterial infections of the genital system are common causes of infertility. One of the most important causes of male infertility is seminal and genital tract infections. In the meantime, a wide range of bacteria, in varying degrees, contribute to infertility in men. <em>Helicobacter pylori</em> may be involve in infertility. Because antibodies against this bacteria have been significantly detected in the genital fluids of infertile patients. The aim of this study was to determine the presence of <em>Helicobacter pylori</em> in the semen of the infertile men with rapid molecular PCR method and determine its percentage.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> 100 samples of semen collected from Saram hospital and DNA Extracted from these specimens using Boiling/DNG_PLUS method.&nbsp; Optimized PCR test was performed on samples. PCR test evaluated from the respect sensitivity and specificity.<br> <strong>Results:</strong> In this study, amplicon with the size of 294 bp, observed with agarose electrophoresis.&nbsp; In the specificity test, primers created only a band for <em>H.pylori</em> DNA. Of the 100 samples tested, only 10 samples (10%) were positive for DNA of <em>H.pylori</em>.<br> <strong>Conclusion:</strong> According to the results of this study, <em>H.pylori</em> may be one of the bacterial agents that can be considered for male infertility, of course requires further studies. While PCR is suitable, quick and sensitive molecular technique for detection of <em>H.pylori </em>in infertile men.<br> &nbsp; تشخیص مولکولی, هلیکوباکتر پیلوری, مردان نابارور, واکنش زنجیره ای پلیمراز Molecular diagnosis, Helicobacter pylori, Infertile men, PCR 67 76 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-1413-2&slc_lang=fa&sid=1 Mostafa khoshbin مصطفی خوش بین Mkhoshbin5134@yahoo.com 100319475328460010945 100319475328460010945 No Department of Microbiology, Basic Sciences, shahr-e-Qods Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد شهر قدس، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Mohammad hassan shahhosseiny محمد حسن شاه حسینی 100319475328460010946 100319475328460010946 Yes Department of Microbiology, Basic Sciences, shahr-e-Qods Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد شهر قدس، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Mansoureh Paknejadi منصوره پاکنژادی 100319475328460010947 100319475328460010947 No Department of Microbiology, Basic Sciences, shahr-e-Qods Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد شهر قدس، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران