fa ایمنی زایی واکسن ژنتیکی DNA و کاهش بار ویروسی در قزل آلا پس از عفونت تجربی با ویروس نکروز عفونی پانکراس (IPNV) سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <a name="OLE_LINK787"></a><a name="OLE_LINK805"></a><a name="OLE_LINK804"><strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">سابقه و هدف:</span></span></strong></a> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ویروس نکروز عفونی پانکراس </span></span>&nbsp;<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">(IPNV)</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">عامل</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">بیماری</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">واگیردار</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">IPN </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">است که باعث تلفات شدید در گونه‌های مختلف آبزیان می‌گردد.</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> این مطالعه با هدف </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ساخت و ارزیابی</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> واکسن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> علیه بیماری </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">IPN</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در قزل آلا انجام گردیده است.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">مواد و روش ها :</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در مطالعه حاضر و<a name="OLE_LINK800"></a><a name="OLE_LINK799">اکسن </a></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">DNA</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">با استفاده از کد کردن آنتی ژن (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">VP2</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">)</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">سویه بومی ویروس </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">IPNV</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> در وکتور یوکاریوتی</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">pcDNA 3.1</span></span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">حاوی پروموتور</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> سیتومگالوویروس</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">(CMV)</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> ایجاد و توسط</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> باکتری </span></span>&nbsp;<em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">E</span></span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">. </span></span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">col</span></span></span></em><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">i</span></span></span></em><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">کلون</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">گردید. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">تایید حضور آنتی ژن </span></span>&nbsp;<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">VP2</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در</span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">وکتور و صحت واکنش لیگاسیون با استفاده از هضم آنزیمی توسط آنزیم های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Hind III </span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">&nbsp;و</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"> XhoI </span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">صورت گرفت. </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">کارایی واکسن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&nbsp;DNA</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">در بچه ماهیان قزل آلا با استفاده از تزریق عضلانی دوز های 2، 5 و10 میکروگرم </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">پلاسمید حاوی توالی آنتی ژن ا</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">رزیابی گردید. بیان آنتی ژن در بافت طحال ماهیان واکسینه شده و هم چنین قابلیت ایمنی زایی و کاهش بار ویروسی در ماهیان بازمانده از عفونت تجربی با استفاده از بیان ژن </span></span>&nbsp;<span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">IPNV-VP4</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> بررسی گردید. </span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">یافته ها:</span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> حضور آنتی ژن تجویز شده 30 روز بعد از واکسیناسیون در بافت طحال ماهیان با استفاده واکنش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">RT-PCR</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> تایید گردید</span></span><strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">.</span></span></strong> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">هم چنین بیان نسبی ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">IPNV-VP4</span></span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">(مارکر بار ویروسی) در بافت‌ طحال</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> و کلیه</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> ماهیان واکسینه شده بازمانده در 45 روز بعد از عفونت تجربی به طور معنی داری پایین&shy;تر از گروه های کنترل بود.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">این پژوهش</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> نشان می&shy;دهد که</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;"> واکسن</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">DNA &shy;</span></span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">ساخته شده </span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">می&shy;تواند باعث ایمنی&shy; زایی قزل&shy;آلا علیه ویروس</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">&shy;</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">IPNV</span></span></span> <span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:12.0pt;">و کاهش بار ویروسی در ماهیان بازمانده از بیماری و متعاقبا مانع از ایجاد حاملین بدون علائم بالینی و انتشار ویروس گردد. </span></span><br> &nbsp; <strong>Background and aim: </strong>Bacterial infections of the genital system are common causes of infertility. One of the most important causes of male infertility is seminal and genital tract infections. In the meantime, a wide range of bacteria, in varying degrees, contribute to infertility in men. <em>Helicobacter pylori</em> may be involve in infertility. Because antibodies against this bacteria have been significantly detected in the genital fluids of infertile patients. The aim of this study was to determine the presence of <em>Helicobacter pylori</em> in the semen of the infertile men with rapid molecular PCR method and determine its percentage.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> 100 samples of semen collected from Saram hospital and DNA Extracted from these specimens using Boiling/DNG_PLUS method.&nbsp; Optimized PCR test was performed on samples. PCR test evaluated from the respect sensitivity and specificity.<br> <strong>Results:</strong> In this study, amplicon with the size of 294 bp, observed with agarose electrophoresis.&nbsp; In the specificity test, primers created only a band for <em>H.pylori</em> DNA. Of the 100 samples tested, only 10 samples (10%) were positive for DNA of <em>H.pylori</em>.<br> <strong>Conclusion:</strong> According to the results of this study, <em>H.pylori</em> may be one of the bacterial agents that can be considered for male infertility, of course requires further studies. While PCR is suitable, quick and sensitive molecular technique for detection of <em>H.pylori </em>in infertile men.<br> &nbsp; آنتی ژن VP2, ویروس IPNV, واکسن DNA, قزل آلا, VP Molecular diagnosis, Helicobacter pylori, Infertile men, PCR 109 117 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-1407-2&slc_lang=fa&sid=1 Sohrab Ahmadivand سهراب احمدی‌وند 100319475328460010958 100319475328460010958 Yes Department of Aquatic Animal Health, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran گروه بهداشت و بیماری‌های آبزیان، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Mehdi Soltania مهدی سلطانی : Msoltani@ut.ac.ir 100319475328460010959 100319475328460010959 No Department of Aquatic Animal Health, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran گروه بهداشت و بیماری‌های آبزیان، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Mahdi Behdani مهدی بهدانی 100319475328460010960 100319475328460010960 No Biotechnology Research Center, Venom & Biotherapeutics Molecules Laboratory, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Reza Hassanzade رضا حسن‌زاده 100319475328460010961 100319475328460010961 No Central Veterinary Laboratory, Iran Veterinary Organization, Tehran, Iran مرکز تشخیص کنترل دارو و مواد بیولوژیک، سازمان دامپزشکی کشور، تهران، ایران