New Cellularand Molecular Biotechnology Journal

fa بررسی میزان بیان ژن‌GPR83 سلول‌های AGS ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-3-tagD Evaluation of GPR83 Gene Expression in AGS Cells Transfected with Pflag-CMV-3-TagD Recombinant Vector سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article سابقه و هدف: عفونت هلیکوباکترپیلوری از عوامل اصلی ایجادکننده سرطان معده در انسان است. ژن tagD هلیکوباکترپیلوری که کد کننده آنزیم تیول پروکسیداز است، نقش مهمی در کلونیزهشدن باکتری در جدار معده انسان ایفا میکند. تحقیقات نشان داده است که ژن GPR83 در سرطان معده افزایش بیان دارند و هدف از این تحقیق بررسی میزان بیان ژن GPR83، در ﺳﻠﻮلهای ﺳﺮﻃﺎﻧﻲ آدﻧﻮﻛﺎرﺳﻴﻨﻮﻣﺎی ﻣﻌﺪه (adenocarcinoma gastric cell <a>line</a><a href="#_msocom_1" id="_anchor_1" name="_msoanchor_1" uage="JavaScript">[S1]</a>  یا (<a>AGS</a><a href="#_msocom_2" id="_anchor_2" name="_msoanchor_2" uage="JavaScript">[M2]</a>  ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-3-tagD بهروش Real Time <a>PCR</a><a href="#_msocom_3" id="_anchor_3" name="_msoanchor_3" uage="JavaScript">[M3]</a>  است. مواد و روشها: سلولهای AGS به کمک محلول لیپوفکتامین و با پلاسمید حامل ژن کد کننده tagD هلیکوباکتر پیلوری یا پلاسمید خالی (کنترل)، ترانسفکت شدند. سپس استخراج RNA از سلولهای کشت داده شده انجام شد و سنتز cDNA صورت پذیرفت و سپس بیان یوکاریوتی ژن <a>tagD</a><a href="#_msocom_4" id="_anchor_4" name="_msoanchor_4" uage="JavaScript">[M4]</a>  هلیکوباکترپیلوری در سلولهای AGS با روش RT-PCR بررسی شد. میزان بیان ژنهای GPR83، با روش Real Time PCR ارزیابی گردید. لازمبه ذکر است که برای بررسی آپوپتوز از کیت انکسین استفاده شد و در نهایت با استفاده از نرمافزار  SPSSو آزمونهای آماری t-test Indepent  بیان هر یک از ژنها بررسی شد. یافته ها: یافتههای به دست آمده از آنالیز بیان ژن نشان داد که بیان ژن GPR83 در سلولهای AGS تیمار شده با tagD نسبتبه سلولهای کنترل افزایش بیان داشت اما این افزایش بیان از لحاظ آماری معنیدار نبود (P= 0.0888).   نتیجه گیری: به طور کلی، دادههای به دست آمده از این تحقیق حاکی از آن بود که بیان ژن GPR83 در سلولهای تحت تیمار با ژن tagD هلیکوباکترپیلوری<a href="#_msocom_5" id="_anchor_5" name="_msoanchor_5" uage="JavaScript">[M5]</a> ، تغییر مییابد و بهنظر میرسد که ژن GPR83 هلیکوباکترپیلوری در ایجاد این تغییر بیان نقش دارد. <div> <hr align="left" size="1" width="33%" > <div><div id="_com_5" uage="JavaScript"></div></div> <div></div></div> <div dir="RTL">Aim and Background: Helicobacter pylori infection is a major cause of gastric cancer in humans. The Helicobacter pylori tagD gene, which encodes the thiol peroxidase enzyme, plays an important role in bacterial colonization in the human stomach wall. Research has shown that the GPR83 gene in gastric cancer increases expression, and the aim of this study was to investigate the expression of the GPR83 gene in AGS cells transfected with the recombinant pFLAG-CMV-3-tagD vector by Real Time PCR.</div> Materials and methods: AGS cells were transfused using lipofactamine solution and plasmid carrying the tagD gene encoding Helicobacter pylori or empty plasmid (control). RNA extraction was then performed from cultured cells and cDNA synthesis was performed, and then the eukaryotic expression of Helicobacter pylori gene tagD in AGS cells was investigated by RT-PCR method. The expression of GPR83 genes was evaluated by Real Time PCR method. It should be noted that the enoxin kit was used to evaluate apoptosis, and finally the expression of each gene was evaluated using SPSS software and t-test Indepent statistical tests. Results: Results: The findings from gene expression analysis showed that the expression of GPR83 gene in AGS cells treated with tagD increased compared to control cells, but this increase in expression was not statistically significant (P = 0.0888). Conclusion: Overall, the data obtained from this study showed that GPR83 gene expression is altered in cells treated with the Helicobacter pylori tagD gene and seems to play a role in the expression of Helicobacter pylori هلیکوباکترپیلوری, tagD, GPR83, AGS, IAU science Helicobacter pylori, tagD, GPR83, AGS, IAU science. 39 48 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-1521-2&slc_lang=fa&sid=1 Fariba Heidari فریبا حیدری 100319475328460012407 100319475328460012407 Yes Department of Biology, Faculty of Science, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران Abbas Doosti عباس دوستی abbasdoosti@yahoo.com 100319475328460012408 100319475328460012408 No Biotechnology Research Center, Shahrekord Branch Islamic Azad University, Shahrekord, Iran مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران