New Cellularand Molecular Biotechnology Journal

fa بررسی اثر پاسخ سلولی انسانی بر روی پپتید حلقوی RGD تثبیت شده بطور کوالانسی بر روی سطح سیلیکون بروش کلیک شیمی Investigation of human cellular response on cyclic RGD peptide immobilized on silicon surfaces via click chemistry سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article سابقه و هدف:  این مطالعه بررسی خواص بیولوژیکی پپتید حلقوی حاوی توالی RGD که از طریق شیمی کلیک بر روی سطح سیلیکون بطورکوالانسی تثبیت گردیده است بررسی می نماید..  مواد و روشها: در این مقاله ابتدا پپتید حلقوی بطور اختصاصی به ۴- ازیدوفنل ایزوتیوسیانات از طریق یک واکنش اختصاصی متصل میگردد و سپس واکنش حلقه زایی ۱و۳- دوقطبی آلکین و آزیدو پپتید  با کاتالیزگر مس منجر به تثبیت کوالانت پپتید بر روی سطح سیلیکون میگردد. ساختارهای سطح پپتید و سطح کنترل بوسیله x-ray  فتوالکترون اسپکتروسکوپی و اینفرارد اسپکتروسکوپی ATR-FTIR بررسی گردید. بعد از کشت سلولهای فیبروبلاست بر روی سطوح پپتید و کنترل، میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM)  و میکروسکوپ روبشی هم کانون لیزری (LSCM) جهت بررسی مورفولوژی سلولهای فیبروبلاست بر روی سطح پپتید و کنترل استفاده گردید. چسبندگی و تکثیر سلولها بر روی سطوح پپتید و کنترل بوسیله آزمون چسبندگی و (MTS)مورد بررسی قرار گرفت. نتایج:  ازمایشات XPS و ATR-FTIR وجود پپتید را بر روی سطح سیلیکون بطور موفقیت امیزی تایید نمودند. میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM)  و میکروسکوپ روبشی هم کانون لیزری (LSCM) نشان دادند که سلولهای فیبروبلاست انسانی بر روی سطح پپتید حلقوی کشیده و تخت هستند به مقدار زیاد و  بصورت زنده و  یکنواختی بر روی سطح پپتید توزیع گردیده اند. نتایج آزمون  چسبندگی سلولی و  (MTS) نشان داد که پاسخ سلولی سلولهای فیبروبلاست بر روی سطوح عامل دارشده با پپتید بطرز چشمگیری بیشتر از سطوح کنترل می باشد. نتیجه گیری: این تحقیق یک روش ساده جهت تولید سطوح بیولوژیکی فعال برای تهیه بستر بیوسنسورهای بیولوژیک جهت تشخیص بیماریها پیشنهاد می نماید.   Aim and Background: This study investigates the biological properties of cyclic RGD peptides being covalently immobilized via click chemistry onto alkyne terminated silicon surfaces. Material and methods: At first cyclic RGD peptides were reacted with 4-azidophenyl isothiocyanate via a specific reaction. The azidated peptide was then covalently immobilized on an alkyne-terminated monolayer on silicon surfaces via the Cu (I)-catalyzed 1, 3-dipolarcycloaddition reaction. The surface structures of the attached peptide and control surfaces were characterized using X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) and Fourier Transform Infrared (ATR-FTIR) Spectroscopy. Then after seeding human fibroblast cells on the peptide and control substrates, Scanning electron microscopy (SEM) and Laser scanning confocal microscopy (LSCM) was used to examine the morphology of human fibroblast cells. Adhesion and proliferation of human fibroblast cells on control and modified surfaces were analyzed by cell adhesion and (MTS) assay. Results: XPS and ATR-FTIR analysis showed the cyclic RGD peptides were successfully immobilized on silicon surfaces. Scanning electron microscopy (SEM) and Laser scanning confocal microscopy (LSCM) demonstrated that human fibroblast cells homogenously distributed across the peptide-modified substrates and had a uniform appearance. Peptide-modified surfaces exhibited substantially superior cellular responses compared to those on control surfaces. Conclusion: The research may suggest a procedure for the fabrication of biologically active surfaces in biosensor platforms.   پپتید RGD حلقوی, سیلیکون, تثبیت کوالانسی, شیمی کلیک., Iau Science. Cyclic RGD peptide, silicon, covalent immobilization, click chemistry., Iau Science. 75 88 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-1697-2&slc_lang=fa&sid=1 Fahimeh shamsi فهیمه شمسی fahimeh.shamsi@ymail.com 100319475328460012837 100319475328460012837 Yes School of Chemical and Biomolecular Engineering, University of Sydney, NSW 2006, Australia دانشکده شیمی و مهندسی بیومولکولی، دانشگاه سیدنی، استرالیا