other بررسی اثر وزیکول های خارج سلولی جدا شده از سویه های بالینی هلیکوباکتر پیلوری در القای انتقال مزانشیمی اپیتلیال در روی رده سلولی HepG2 مقاوم به انسولین میکروبیولوژی Microbiology مقاله پژوهشی Research Article <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">سابقه و هدف: </span></span></b><i><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">هلیکوباکتر پیلوری</span></span></i><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> (</span></span></b><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Helicobacter pylori</span></span></i><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">) </span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">یک پاتوژن گرم منفی بوده که<b> </b>قادر است وزیکول های خارج سلولی آزاد کند که حاوی پروتئین ها و عوامل بیماری زایی متعددی هستند. این باکتری علاوه بر بیماری های معده در ایجاد بیماری های خارج از معده مانند مقاومت به انسولین</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نیز نقش دارد. </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">انتقال اپیتلیال-مزانشیمی</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">یک فرآیند کلیدی در گسترش سرطان به شمار می رود که عوامل متعددی در شروع این فرآیند نقش دارند،</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> اما با این حال نقش دقیق انسولین در </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">انتقال اپیتلیال-مزانشیمی</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> مشخص نشده است.<b> </b>هدف این مطالعه بررسی<b> </b>اثر </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">وزیکول</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> های خارج سلولی مشتق شده از<b> </b><i>هلیکوباکتر پیلوری</i><b> </b>در القای </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">انتقال اپیتلیال-مزانشیمی</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در رده سلولی </span></span><span dir="LTR" lang="EN-GB" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">HepG2</span></span><b> </b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">مقاوم به انسولین می باشد.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">مواد و روش‌ها: </span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">در این مطالعه از دو سویه بالینی <i>هلیکوباکتر پیلوری</i> بدست آمده از بیماران مبتلا به گاستیریت و زخم معده استفاده شد. </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">وزیکول </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">های استخراج شده از این باکتری توسط اولتراسانتریفیوژ استخراج گردید. جهت بررسی اثر وزیکول</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">&shy;</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">های خارج سلولی<i> هلیکوباکتر پیلوری</i> در القای </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">انتقال اپیتلیال-مزانشیمی</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در شرایط مقاومت به انسولین، مدل مقاومت انسولینی بر روی رده سلولی </span></span><span dir="LTR" lang="EN-GB" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">HepG2</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> ایجاد شد.<b> </b>آزمون </span></span><span dir="LTR" lang="EN-GB" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">RT-qPCR</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> جهت بررسی میزان بیان ژن های کلیدی دخیل در فرآیند </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">انتقال اپیتلیال-مزانشیمی همچون</span></span> <span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">E-cadherin, snail, vimentin</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> انجام شد.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">یافته‌ها: </span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتایج حاصل از </span></span><span dir="LTR" lang="EN-GB" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">RT-qPCR</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> نشان داد، وزیکول های مشتق شده از <i>هلیکوباکتر پیلوری</i> در شرایط مقاومت به انسولین قادر به افزایش بیان ژن های </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">snail</span></span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> ، </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">vimentin</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و کاهش بیان ژن </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">E-cadherin</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> هستند.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتیجه</span></span></b><b><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt">‌</span></b><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">گیری:</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> نتایج بدست آمده از مطالعه حاضر نشان داد وزیکول های خارج سلولی حاصل از <i>هلیکوباکتر پیلوری</i> علاوه بر القای مقاومت انسولینی قادر به القای فرآیند </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">انتقال اپیتلیال-مزانشیمی</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در رده سلولی </span></span><span dir="LTR" lang="EN-GB" style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">HepG2</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> هستند.</span></span></span></span></span></span></span><br> &nbsp; <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt">Aim and Background: </span></span></span></b><i><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt">Helicobacter</span></span></span></i><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt"> <i>pylori</i> is a Gram-negative and microaerophilic pathogen that can release extracellular vesicles (EVs) containing proteins and different virulence factors. In addition to gastroduodenal diseases, this bacterium also plays a role in extra-gastroduodenal diseases such as insulin resistance (IR). Epithelial-mesenchymal transition (EMT) is considered a key process in the development of cancer, and several factors contribute to the initiation of this process, but the exact role of insulin in the EMT process has not yet been elucidated. This study aimed to investigate the effect of <i>H</i>. <i>pylori</i>-derived EVs on the induction of EMT in the insulin-resistant HepG2 cell line.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt">Materials and Methods:</span></span></span></b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt"> Two clinical isolates of <i>H. pylori</i> were obtained from patients with gastritis and peptic ulcer. Ultracentrifugation was used to extract <i>H. pylori</i>-derived EVs. In order to investigate the effect of EVs on the induction of EMT in IR, the HepG2 cell line was used to establish the IR model. An RT-qPCR assay was performed to evaluate the expression level of key genes involved in the EMT process, such as E-cadherin, snail, vimentin.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt">Results:</span></span></span></b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt"> The results of RT-qPCR showed that <i>H. pylori</i>-derived EVs can increase the expression of snail and vimentin and decrease the expression of <i>E-cadherin</i> genes under IR conditions.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt">Conclusion:</span></span></span></b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="letter-spacing:-.2pt"> The results obtained from the present study showed that<i> H. pylori</i>-derived EVs are capable of inducing the EMT process in the HepG2 cell line in addition to inducing hepatic IR.</span></span></span></span></span></span></span><br> &nbsp; هلیکوباکتر پیلوری, مقاومت به انسولین, انتقال مزانشیمی اپیتلیال, سلول های HepG2, ژن E-cadherin Helicobacter pylori, insulin resistance, epithelial-mesenchymal transition, HepG2 cells, E-cadherin 49 61 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-2013-6&slc_lang=other&sid=1 Ghazaleh Talebi غزاله طالبی 100319475328460015559 100319475328460015559 No Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم و فناوری های همگرا، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. Parvaneh Saffarian پروانه صفاریان 100319475328460015560 100319475328460015560 No Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، دانشکده علوم و فناوری های همگرا، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران. Mojdeh Hakemi-Vala مژده حاکمی والا 100319475328460015561 100319475328460015561 No Department of Microbiology, Medical school, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروبشناسی، دانشکده پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران. Amir Sadeghi امیر صادقی 100319475328460015562 100319475328460015562 No Gastroenterology and Liver Diseases Research Center, Research Institute for Gastroenterology and Liver Diseases, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran مرکز تحقیقات بیماری‌های گوارش و کبد، پژوهشکده بیماری‌های گواش و کبد، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Abbas Yadegar عباس یادگار babak_y1983@yahoo.com 100319475328460015563 100319475328460015563 Yes Foodborne and Waterborne Diseases Research Center, Research Institute for Gastroenterology and Liver Diseases, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran مرکز تحقیقات بیماری‌های منتقله از آب و غذا، پژوهشکده بیماری‌های گوارش و کبد، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران.