fa بیان آلبومین سرم انسانی نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی سویه (DE3) BL21 بیوشیمی Biochemistry مقاله پژوهشی Research Article <p style="DIRECTION: rtl"><strong>سابقه وهدف: </strong>آلبومین سرم انسان از مهم ترین ترکیبات سیستم گردش خون می باشد . این پروتئین حامل بسیاری از هورمون ها ومتابولیت ها در بدن بوده و در تثبیت حجم خون و درمان انواع سوختگی ها مؤثر می باشد. چون تهیه آن از پلاسمای خون پرهزینه بوده و همراه با آلودگی به پاتوژن ها ی مختلف است، تولید آن توسط روش های بیوتکنولوژی ضروری به نظر می رسد</p><p style="DIRECTION: rtl"><a name="_Toc313740833"><strong> مواد و روش ها: </strong></a>ژن آلبومین سرم انسان ( HSA ) براساس توالی موجود در بانک ژن سنتز شد و بعد از کلون در وکتور pET22b به سلول پذیرای <i>BL21 (DE3) </i>انتقال یافت .کلنی حاوی پلاسمید نوترکیب، کشت داده شد و هنگامی که به 6/0 = ₆₀₀OD رسید، با mM 5/1 IPTG القا شد. سپس در ساعات مختلف رسوب گیری انجام شد و روی ژل 10% SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت . تولید پروتئین با روش وسترن بلات تائید گردید و تخلیص پروتئین توسط کروماتوگرافی تمایلی انجام شد. </p><p style="DIRECTION: rtl"><strong>یافته ها: </strong>دراین مطالعه آلبومین انسانی در فضای پری پلاسمیک باکتری تولید شد. بیشترین میزان پروتئین نوترکیب تولید شده ، 24 ساعت پس از القاء بو . <strong>نتیجه گیری<i>:</i> </strong>در این مطالعه آلبومین انسانی به صورت نوترکیب در اشرشیا کلی تولید شد. </p> <p><strong>Aims and Background<em>. </em></strong>Human serum albumin (HSA) is the most important components of the circulatory system. HSA can transport many metabolites and hormones in the body . It is effective for blood volume stabilization and the burn treatment. The preparation of HSA from human plasma is costly and the risk of contamination with various pathogens is high. Therefore, biotechnology could promise a new way to solve the problems. </p><p><strong>Materials and methods.</strong> HSA gene was synthesized based on the sequence of the gene in NCBI website . HSA was cloned into pET 22 b expression vector and then t he recombinant plasmid was transformed into <i>BL21 (DE3)</i> competent cell . The colony (containing recombinant expression vector) was cultured overnight. The culture was induced with IPTG 1/5 mM in the logarithmic phase (OD₆₀₀=0.6). Sampling was carried out in different times and it was analyzed on %10 (w/v) SDS-PAGE. The expression of recombinant human serum albumin (rHSA) was confirmed by western blot. Finally, rHSA was Alpha purified by affinity chromatography. </p><p><strong>Results.</strong>In this study, human serum albumin was produced in the bacterial periplasmic environment.  The highest expression level of rHSA was observed 24 h after the bacterial induction. </p><p><strong>Conclusion.</strong>  In this study, rHSA was produced in <i>E.coli</i> host.</p> آلبومین سرم انسانی، ( DE3 ) BL21 ، pET22b Human serum Albumin, BL21 ) DE3 ( , pET22b 61 66 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-61-50&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Ghafari فاطمه غفاری 10031947532846002086 10031947532846002086 No 1. Biology group, Science and Research Branch Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی ، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات، تهران- ایران Farnaz Kheirandish فرناز خیر اندیش 10031947532846002087 10031947532846002087 No 2. Departement of Parasitology and Mycology, School of Medicine, Lorestan University of Medical Sciences, Khoramabad, Iran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، دانشکده پزشکی، خرم آباد- ایران Bahram Kazemi بهرام کاظمی 10031947532846002088 10031947532846002088 No Cellular and Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences,Tehran,Iran and Biotechnology Departement, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences,Tehran,Iran مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی ومولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران- ایران Mohammad davod Ghafari محمد داود غفاری 10031947532846002089 10031947532846002089 No Shahed University,Tehran, Iran گروه میکروبیولوژی ،دانشگاه شاهد، تهران- ایران Mojgan Bandehpour مژگان بنده پور bandehpour@gmail.com 10031947532846002090 10031947532846002090 Yes Cellular and Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences,Tehran,Iran and Biotechnology Departement, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences,Tehran,Iran گروه بیوتکنولو‍ژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران- ایران