fa مطالعه و شناسایی مولکولی Brucella spp.در محصولات لبنی توسط تکنیک Nested PCR سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <p style="DIRECTION: rtl"><strong>سابقه و هدف</strong>: بروسلا یک کوکوباسیل گرم منفی است که میزبانهای آن شامل انسان، گاو، بز، گوسفند و اسب می باشد. بروسلا از طریق شیر و فراورده های لبنی انتقال یافته و در انسان سبب ایجاد تب مالت می شود. روشهای سرولوژیک تشخیص آن از حساسیت و دقت کافی برخوردار نبوده، علاوه بر آن، دارای نتایج مثبت و منفی کاذب فراوانی می باشند. هدف از این مطالعه بررسی میزان شیوع بروسلا در برخی از محصولات لبنی توسط تکنیک PCR Nested و تعیین حساسیت و دقت این تکنیک می باشد. </p><p style="DIRECTION: rtl"><strong>مواد و روشها</strong>: در این مطالعه 208 نمونه از محصولات لبنی شامل: 57 نمونه شیر خام گاو ، 34 نمونه شیر پاستوریزه ، 28 نمونه پنیر پاستوریزه ، 23 نمونه پنیر سنتی، 33 نمونه شیر خام بز و 33 نمونه شیر خام گوسفند، از سطح استان تهران جمع آوری گردید. DNA نمونه ها به وسیله کیت (Cinna gene, Iran) DNP استخراج شد. سپس تست PCR Nested با کمک پرایمرهای اختصاصی بهینه گردید، حساسیت و اختصاصیت تکنیک مورد ارزیابی قرار گرفت. </p><p style="DIRECTION: rtl"><strong>یافته ها</strong>: بررسی ها نشان داد از 57 نمونه شیر خام گاو، 19 نمونه ، و از 34 نمونه شیر پاستوریزه، 10 نمونه، همچنین از 28 نمونه پنیر پاستوریزه فقط، 8 نمونه، و از 23 نمونه پنیر سنتی، 14 نمونه و از 33 نمونه شیر خام بز، 21 نمونه و در آخر از 33 نمونه شیر خام گوسفند ، 19 نمونه PCR مثبت شدند. </p><p style="DIRECTION: rtl"><strong>نتیجه گیری</strong>: نتایج نشان می دهد، تکنیک Nested PCR مورد بررسی در این مطالعه از حساسیت و دقت بالایی برخوردار است. از این رو، به نظر می رسد ضرورت استفاده از روشهای مولکولی به عنوان یک روش تاییدی جهت تشخیص بروسلا در کنار روشهای متداول غربالگری امری لازم می باشد. </p> <p><strong>Aim and Background</strong>: Brucella spp. is a gram negative coco bacillus which has different hosts including human, cow, goat, sheep and horse. Brucella spp. is transferred via milk and dairy products causing a Malta fever in human. Serological methods for Brucella spp. detection do not have sufficient sensitivity and accuracy in addition, they have great false positive and negative results. The aim of this study is to assess the prevalence of Brucella spp. in dairy products with Nested PCR technique and evaluation of specification and sensitivity of this technique. </p><p><strong>Material and methods</strong>: In this study 208 samples from dairy products including: 57 raw cow milk, 34 pasteurized cow milk, 28 pasteurized cheese, 23 traditional cheese, 33 raw goat milk and 33 raw sheep milk samples, were collected from Tehran and suburbs. DNA was extracted using DNP kit (Cinnagene, Iran) from samples. After optimization of first and second round of PCR for Nested, with the help of each specific primer, sensitivity and specificity technique was evaluated. </p><p><strong>Results</strong>: The studies showed, Among 57 samples of raw cow milk, 19 cases were PCR positive. In 34 pasteurized milk samples 10 cases were PCR positive, from 28 pasteurized cheese samples only 8 cases, from 23 traditional cheese DNA samples 14 cases, out of 33 samples of raw goat milk 21 cases and finally from 33 samples of raw sheep milk 19 cases were PCR positive. </p><p>C<strong>onclusion</strong>: With respect to this result, Nested PCR technique investigated in this study, has significant sensitivity and accuracy therefore, the molecular technique as a confirmatory method in detection of Brucella spp. seems necessary and inevitable for serological methods. </p> بروسلا، محصولات لبنی، Nested PCR Brucella spp., dairy products, Nested PCR 91 98 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-401-3&slc_lang=fa&sid=1 amir Izadi امیر ایزدی amir_izad@yahoo.com 10031947532846002645 10031947532846002645 Yes Young Researcher Club, East Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. دانشگاه آزاد اسلامی ، واحد تهران شرق ، باشگاه پژوهشگران جوان elham Moslemi الهام مسلمی 10031947532846002646 10031947532846002646 No Department of Biology, East Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. گروه زیست سلولی مولکولی. دانشگاه آزاد اسلامی ، واحد تهران شرق ، گروه زیست شناسی