fa توسعه یک روش PCR جهت تشخیص آلودگی های مایکوپلاسما در رده های سلولی و فراورده های بیولوژیکی سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <b> سابقه و هدف : </b>آلودگی لاین های سلولی و فراورده های بیولوژیکی یکی از مشکلات عمده تکنیک کشت سلولی می باشد. تشخیص سریع و دقیق آلودگی مایکوپلاسما قسمت مهمی از کنترل آزمایشگاه های کشت سلول است، وباید روشی در هر آزمایشگاه کشت سلول وجود داشته باشد. سلول های آلوده منتهی به نتایج غیر قابل اطمینان می شود، بنابراین نیاز به یک روش مطمئن در آزمایشگاه امری ضروری می باشد. واکنش زنجیره ای پلیمراز یک تکنیک سریع، حساس و با ویژگی بالا در تشخیص باکتریها به شمار می رود. هدف از این مطالعه بررسی کارآیی PCR در شناسایی آلودگیهای کشت سلول و سایر فرآورده های بیولوژیک است. <div style="direction: rtl">مواد و روش ها: در این مطالعه ابتدا تکنیک PCR با استفاده از پرایمرهای MGSO و GPO-1و هدف ژنی 16SrRNA بهینه گردید. همچنین روشPCR مورد استفاده از لحاظ حساسیت و ویژگی بررسی گردید. سرانجام DNAبه روشی ساده از 72 لاین سلولی استخراج و با PCR آزمایش شد. </div><div style="direction: rtl"><b>یافته ها:</b> محصول 715 جفت بازی توسط پرایمرها تکثیر و از طریق تعیین توالی تائید گردید. در بررسیهای ویژگی، با هیچکدام از DNA های تست شده محصولی تکثیر نشد. این روش دارای حساسیتی در حد 10 کپی از ژنوم هدف بوده و با DNA میکروارگانیسم های دیگر، آمپلیکون ناخواسته ای مشاهده نشد.  </div><div style="direction: rtl"><b>نتیجه گیری</b>: نتایج حاصله از این مطالعه مشخص می کند که این روش مولکولی در تشخیص آلودگی مایکوپلاسما در کشت های سلولی و فراورده های بیولوژیک از حساسیت و ویژگی بالایی برخوردار می باشد. </div> <div style="text-align: left"><b style="line-height: 2.2">Aim and Background:</b> Contamination of cell linesandbiological productsisone of the major problemsof cell culturetechniques. Rapiddetection ofMycoplasmacontaminationincell cultureisan importantpartof controlledlaboratory, and shouldthere bea methodinlaboratorycell cultures. Infectedcells,leading tounreliableresults, so the need for areliablemethod forlaboratoriesisessential. Polymerase chain reaction, a technique ofrapid, sensitive andspecificdetection ofbacteriais considered. The aim ofthisstudy was to evaluatethe efficacy ofPCRin the detectionofpollutants incell culturesand otherbiologicalproducts.</div><div style="text-align: left"><b>Materials and Methods: </b>Inthisstudy ,PCR techniques usingprimers MGSO and GPO-1andtargetgene 16SrRNA was optimized. AlsousedPCRmethodwas evaluatedin terms ofsensitivity and specificity. Finally,a simpleDNAextractionandPCRof 72celllinestested. </div><div><div style="text-align: left"><b style="line-height: 2.2">Result</b>:A715bpproduct wasamplifiedby theprimersandwas confirmedbysequencing. TheReviewsfeature, withnone ofthe testedDNAwasamplified products. Thismethodhas asensitivitylimit of10copiesofthetargetDNA. No cross-reactivity with genomic DNA of other microorganisms was observed </div><div style="text-align: left"><b>Conclusion:</b> The results ofthisstudyindicatethatthemolecularmethodsfor detection ofMycoplasmacontaminationincell culturesorBiologicProductsofallergyandhighspecificityis </div></div> مایکوپلاسما, پی سی آر, آلودگی, تشخیص مولکولی, کشت سلول Mycoplasma, PCR, contamination,molecular detection, cell culture 41 46 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-319-2&slc_lang=fa&sid=1 Mahdieh ghiasi مهدیه سادات غیاثی Mahdieh.ghiasi@yahoo.com 10031947532846003241 10031947532846003241 Yes Islamic Azad University دانشگاه علوم تحقیقات اراک، گروه میکروبیولوژی، اراک-ایران Mohamad hasan shahhosseiny محمد حسن شاه حسینی 10031947532846003242 10031947532846003242 No Islamic Azad University دانشگاه آزاد اسلامی. واحد شهر قدس، گروه میکروبیولوژی، تهران- ایران Hamid reza mohajerani حمید رضا مهاجرانی 10031947532846003243 10031947532846003243 No Islamic Azad University دانشگاه علوم تحقیقات اراک، گروه میکروبیولوژی، اراک-ایران