New Cellularand Molecular Biotechnology Journal
مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي
NCMBJ
Basic Sciences
http://ncmbjpiau.ir
1
admin
2228-5458
2228-6926
-
-
-
8888
-
fa
jalali
1393
6
1
gregorian
2014
9
1
4
15
online
1
fulltext
fa
تولید ادجوانت آرکئوزومی از لیپیدهای قطبی غشایی با استفاده از کشت انبوه Methanobrevibacter smithii
Preparation of Archaeosome Adjuvant from membrane Polar lipids of large scale cultured Methanobreveibacter smithii
ژنتیک
Genetics
مقاله پژوهشی
Research Article
<b>
سابقه و هدف:</b> از جمله ادجوانت هایی که امروزه مورد توجه قرار گرفته اند و از ویژگی های اختصاصی فراوانی برخوردارند ترکیباتی لیپوزومی با منشائی منحصر به فرد یعنی آرکی ها (آرکی باکتری ها) می باشند که تحت عنوان آرکئوزوم (Archaeosome) نامیده می شوند. هدف از انجام این مطالعه کشت انبوه آرکی Methanobrevibacter smithii در فرمانتور و سپس تولید ادجوانت آرکئوزومی از لیپیدهای قطبی استخراج شده از توده سلولی حاصل و بررسی ویژگی های مختلف آرکئوزوم استخراج شده می باشد. <div style="direction: rtl"><b>مواد و روش ها:</b> به منظور دستیابی به توده سلولی جهت استخراج لیپیدهای آرکیایی (Archaeal lipids)، Methanobrevibacter smithii (DSMZ 2375) در فرمانتور و تحت شرایط کنترل شده pH، دما و شرایط اتمسفری بی هوازی کشت داده شد. سپس لیپیدهای قطبی آرکیایی با استفاده از ترکیب متانول، کلروفرم و آب استخراج گردید و در مرحله بعد به واسطه آبدهی لیپیدهای قطبی با بافر حاوی BSA لیپوزوم آرکیایی (آرکئوزوم) ساخته شد.آرکئوزوم ها به لحاظ عدم وجود آلودگی DNA و پروتیئن و مقدار آنتی ژن وارد شده در ساختمان آنها با استفاده از تکنیک های الکتروفورز بر روی ژل آگاروز، سنجش پروتئین به روش Lowry و با استفاده از دستگاه Picodrop و SDS-PAGE بررسی شدند. </div><div style="direction: rtl"><b>یافته ها:</b> نتایج به دست آمده از ارزیابی لیپیدهای قطبی و آرکئوزوم های تولید شده نشان دهنده غلظت بالای لیپید، قرارگیری مناسب آنتی ژن درون آرکئوزوم ها و خلوص این لیپوزوم ها می باشد. </div><div style="direction: rtl"><b>نتیجه گیری:</b> لیپیدهای استخراج شده با غلظت بالا و تولید کارآمد آرکئوزوم حاوی آنتی ژن با درجه خلوص بالا می تواند در مطالعات آینده در زمینه تحقیقات واکسن به همراه آنتی ژن های مختلف به عنوان یک ترکیب لیپوزومی با پایداری بالا و ویژگی های بالقوه ادجوانتی به کار گرفته شود.
</div>
<b>
Aim and Background:</b> Archaeal lipid derived liposomes referred to as Archaeosomes are among newly studied adjuvants with some specific immunopotent properties. In the present study large scale cultivation of Methanobrevibacter smithii, lipid extraction of obtained biomass and archaeosome production was assessed and evaluated.
<div><b>Materials and Methods:</b> archaea Methanobrevibacter smithii, DSMZ 2375 was grown in the fermenter under controlled pH, temperature and anaerobic atmosphere condition to achieve archaeal cell mass. Total polar lipids were extracted via methanol/chloroform/water (2:1:0.8 v/v) solution from the frozen and thawed archaeal cells obtained from large scale cultivation. Archaeal liposomes prepared through hydration of extracted polar lipids by PBS buffer containing bovine serum albumin as the tentative antigen. Hydration was also carried out by BSA free PBS buffer to prepare antigen free archaeosomes to be compared with antigen containing type. Purity of extracted lipids evaluated via agarose gel electrophoresis and SDS-PAGE. Antigen concentration and entrapment analyzed by Lowry method and SDS-PAGE, respectively. </div><div><b>Results:</b> Analysis of extracted lipids and archaeosomes revealed the high concentration and purity of obtained total polar lipids and successful entrapment of antigen in the archaeosomes.
</div><div><b>Conclusion:</b> Adjuvant application of archaeosomes obtained from total polar lipids of Methanobrevibacter smithii could be a promising achievement in a variety of vaccine studies.
</div>
ادجوانت, آرکئوزوم, لیپیدهای قطبی, متانوبروی باکتر اسمیتی
Adjuvant, Archaeosome, Polar lipids, Methanobrevibacter smithii
51
59
http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-469-2&slc_lang=fa&sid=1
Ali
Sharifat Salmani
علی
شریفات سلمانی
alisharifat@gmail.com
10031947532846003368
10031947532846003368
Yes
Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran.
گروه زیست شناسی واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
Mohamad Reza
Aghasadeghi
محمدرضا
آقاصادقی
10031947532846003369
10031947532846003369
No
Hepatitis and Aids department, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran.
گروه هپاتیت و ایدز انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
Rakhshandeh
Nategh
رخشنده
ناطق
10031947532846003370
10031947532846003370
No
Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran.
گروه زیست شناسی واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
Talat
Mokhtari Azad
طلعت
مختاری آزاد
10031947532846003371
10031947532846003371
No
Department of Virology, School of Public Health, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran.
گروه ویروس شناسی دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران
Seyed Davar
Siadat
سید داور
سیادت
10031947532846003372
10031947532846003372
No
Mycobacteriology and Pulmonary Research Department, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
گروه سل و تحقیقات ریوی انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران