fa کلونینگ و بیان پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا H1N1 در باکتری Ecoli سویه BL21(DE3) ژنتیک Genetics مقاله پژوهشی Research Article <b> سابقه و هدف:</b> ویروس انفلوانزا A یکی از عوامل اصلی مرگ ومیر سالیانه می باشد و از سال 1960 میلادی بر علیه آن واکسن موثر در دسترس بوده است. تغییرات مداوم آنتی ژنیک ویروس چالش بزرگی در مسیر تولید سالیانه واکسن می باشد. در حال حاضر محققین روی آنتی ژنهای ثابت ویروس مطالعه می کنند. پروتئینM2 یک کانال یونی درون پوشش ویروس انفلوانزای A تشکیل می دهد که در عفونت زایی آن موثر است. این پروتئین حفاظت شده است و هدف مناسبی برای تولید واکسن انفلوانزا میباشد. <div style="direction: rtl"><b>مواد و روش ها:</b> با توجه به محدودیت کشت ویروس انفلوانزا در آزمایشگاه توالی ژن M2 از ویروس سویه H1N1 ایران انتخاب و سنتز شد. ژن M2 در وکتور pET22b ساب کلون گردید. پروتئین نوترکیب در باکتری E.coli سویه BL21DE3 بیان و از آنتی بادی اختصاصی در روش SDS-PAGE و وسترن بلات برای تایید آن استفاده شد. </div><div style="direction: rtl"><b>یافته ها:</b> غلظت پروتئین حاصل 300 میکروگرم در هر میلی لیتر بدست آمد و با آنتی بادی اختصاصی تایید گردید. </div><div style="direction: rtl"><b>نتیجه گیری:</b> پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا در باکتری Ecoli سویه BL21 (DE3) قابل بیان است. </div> <b> Aim and Background:</b> Influenza A is a major cause of mortality in a year. There has been an efficient vaccine available against it since 1960. Antigenic variation is a preventive agent for yearly vaccine production. Now researchers focus on the constant antigens of viruses. M2 protein makes an ionic channel in the coat of influenza, a virus that is effective on infection by virus. This protein is conserved and it is considered as a proper candidate vaccine for influenza infection.  <div><b>Materials and Methods:</b> Due to limitations for influenza virus culture at the lab, the sequence of influenza virus H1N1 strain of Iran was synthesized. It was sub-cloned into pET22b vector recombinant protein and expressed in BL21 E.coli and confirmed with specific antibody by SDS-PAGE and western blot techniques.  </div><div><b>Results: </b>The concentration of recombinant M2 protein was 300μg/ml confirmed by specific antibody.  </div><div><b>Conclusion:</b> Influenza M2 protein could be expressed in BL21 E.coli host. </div> کلونینگ, ویروس آنفلوانزا, بیان ژن Cloning, Influenza virus, Gene expression 61 65 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-455-2&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Jafarinejad فاطمه جعفری نژاد 10031947532846003373 10031947532846003373 No 1- Biology Department, Azad University of Ahar, Ahar, Iran - گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اهر، اهر، ایران Golnaz Asadi Tehrani گلناز اسعدی تهرانی 10031947532846003374 10031947532846003374 No 2- Microbiology & Animal Biology, Azad University of Zanjan,Zanjan, Iran - گروه میکروبیولوژی و زیست جانوری، دانشگاه آزاد اسلامی واحد زنجان، زنجان، ایران Mohammad Aminbakhsh محمد امین بخش 10031947532846003375 10031947532846003375 No 1- Biology Department, Azad University of Ahar, Ahar, Iran - گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اهر، اهر، ایران Bahram Kazemi بهرام کاظمی 10031947532846003376 10031947532846003376 No 3- Cellular & Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran 3- مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Vahid reza Yasaee وحید رضا یاسائی 10031947532846003377 10031947532846003377 No 5- Genomic Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran 5- مرکز تحقیقات ژنومیک، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Fatameh Yarian فاطمه یاریان 10031947532846003378 10031947532846003378 No 3- Cellular & Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran 3- مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Ameneh Koochaki آمنه کوچکی 10031947532846003379 10031947532846003379 No 3- Cellular & Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran 3- مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Zeinab Soleimani far زینب سلیمانی فر 10031947532846003380 10031947532846003380 No 3- Cellular & Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran 3- مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Mojgan Bandehpour مژگان بنده پور m.bandehpour@sbmu.ac.ir 10031947532846003381 10031947532846003381 Yes 3- Cellular & Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran 3- مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران