fa شناسایی و تعیین هویت مولکولی ایزوله‌ های کوکسی گرم مثبت عامل استرپتوکوکوزیس جدا ‌شده از ماهیان قزل آلای رنگین‌کمان در استان مرکزی سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <div align="right" style="direction: rtl"> <b>سابقه و هدف: </b>یکی ازمهم ترین بیماری ‌‌‌های ماهیان پرورشی به خصوص قزل آلا بیماری استرپتوکوکوزیس است که می تواند باعث مرگ و میر تعداد زیادی از ماهیان شده و خسارات سنگینی به مراکز پرورش ماهی وارد کند. در این تحقیق جهت شناسایی و تعیین هویت دقیق و مطمئن ایزوله‌ های کوکسی گرم مثبت عامل استرپتوکوکوزیس از روش PCR و تعیین توالی استفاده شده است. <br><b>مواد و روش‌ها: </b>طی بهار و تابستان 1390 از 12 مزرعه استان مرکزی نمونه برداری به عمل آمد. از هر مزرعه تعداد 10 عدد ماهی در حال مرگ یا دارای علائم کلینیکی انتخاب گردید. نمونه ‌ها در محیط بلاد آگار کشت داده شد و به مدت72 ساعت در دمای37درجه سانتی گراد انکوبه گردید. سپس آزمایشات متداول میکروبیولوژی برای تایید نمونه های مشکوک به استرپتوکوکوزیس صورت گرفت. جهت تعیین نوع آنتی ‌بیوتیک موثر بر باکتری‌ های شناخته شده آزمون آنتی‌ بیوگرام با روش دیسک دیفیوژن انجام شد. کلیه نمونه‌ های مثبت میکروبی مورد آزمایش PCR و تعیین توالی قرار گرفتند.<br><b>یافته ها: </b>در این طرح12 جدایه کوکسی گرم مثبت از بافت های کلیه، مغز، کبد و طحال120 ماهی قزل آلای بیمارتوسط آزمایشات میکروبیولوژی جدا سازی شد. تمامی نمونه ‌های مثبت میکروبی در آزمایش PCR (براساس ژن16SrRNA) مثبت تشخیص داده شد واین کوکسی‌ های گرم مثبت پس از تعین توالی به عنوان لاکتوکوکوس گارویه شناسایی شدند و با استفاده از آنتی‌ بیوگرام نمونه‌ ها، مقاومت آن ‌ها به کولیستین، لینکومایسین، کلوگزاسیلین، استرپتومایسین، نالیدیکسیک‌ اسید تایید شد. <br><b>نتیجه گیری:</b> لاکتوکوکوس‌ گارویه یکی از عوامل اصلی بیماری استربتوکوکوزیس شایع در استان مرکزی است. </div> <b>Aims and Background:</b> Streptococcosis is one of the most important diseases of the farmed fishes specially, rainbow trout, causing the death of many fishes and also leading to heavy damages on aquaculture centers. This research deals with the exact recognition and determination of Gram-positive cocci isolates (Streptococcosis agent), using PCR and sequencing analysis. <br><b>Materials and Methods:</b> the sampling was performed during spring and summer 2011 from 12 farms of Markazi province and 10 fish were selected with death-sick or clinical signs from each farm. Firstly the samples were cultivated in blood agar and incubated for 72 hours in 37˚C, then the conventional microbiology experiments were conducted on the suspected samples to confirm Streptococcosis disease. Also antibiogram test was carried out using disk diffusion method to determine the effective antibiotic type on known bacteria. All the positive microbial samples were subjected to PCR and sequencing experiments. <br><b>Results:</b> In this research, 12 isolates of Gram-positive cocci were separated from kidney, brain, liver and spleen of 120 rainbow trout patients by microbiological and some biochemical tests. All positive microbial samples in PCR test (based on 16SrRNA gene) were recognized positive and determined as Lactococcus garvieae based on sequencing analysis. The resistance of gram-positive cocci to colistin, lincomycin, cloxacillin, streptomycin and nalidixic acid were shown on antibiograms disk diffusion experiment. <br><b>Conclusion: </b>Lactococcus garvieae is major gram-positive cocci in infected fish farms in Markazi province. PCR, ماهی قزل آلای رنگین‌ کمان, استرپتوکوکوزیس, 16SrRNA PCR, rainbow trout, Streptococcosis, 16SrRNA 75 82 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-700-3&slc_lang=fa&sid=1 Nasrin Farhadzadeh نسرین فرهادزاده 10031947532846004223 10031947532846004223 No Department of Microbiology, Qom Branch, Islamic Azad University, Qom, Iran. گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی قم، واحد قم، ایران Seyed Davood Hosseini سید داود حسینی Hosseinida@yahoo.com 10031947532846004224 10031947532846004224 Yes Razi Vaccine and Serum Research Institute, Markazi Branch, Arak, Iran. موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی شعبه مرکزی، اراک، ایران Ahmad Ali Porbabai احمد علی پوربابایی 10031947532846004225 10031947532846004225 No Department of Microbiology, Qom Branch, Islamic Azad University, Qom, Iran. گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی قم، واحد قم، ایران