fa ارزیابی بیان فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت نوترکیب انسانی با کدون بهینه شده در دو سویه بیانی اشریشیا کلی Origami وBL21 سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <div align="right" style="direction: rtl"> <b>سابقه و هدف: </b>فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت (G-CSF) به عنوان فاکتور رشد هماتوپوئیتیک می‌‌تواند سلول‌های بالغ خونی را تحریک نمایند و امروزه نوع نوترکیب آن در درمان نوتروپنی ناشی از شیمی درمانی سرطان‌های سرکوبگر میلوئید، پیوند مغز استخوان، شیمی درمانی در لوسمی میلوئید حاد و نوتروپنی مزمن و شدید به کار می‌رود. هدف از این مطالعه، مقایسه بیان G-CSF نوترکیب انسانی در دو سویه از اشریشیاکلی بوده است. <b>مواد و روش‌ها: </b>ژن G-CSFانسانی با تغییر کدون‌های آن به صورت بهینه شده برای بیان در سیستم پروکاریوتی، در وکتور pGEM سنتز شده و در وکتور بیانی pET23a همسانه‌سازی شد. سپس وکتور pET/G-CSF در دو سویه بیانی از اشریشیاکلی به نام Origami و BL21، ترانسفرم شد و بیان آن در این دو میزبان مقایسه گردید. <br><b>یافته‌ها: </b>نتایج هضم آنزیمی، صحت مراحل کلونینگ را در وکتور pET23a نشان داد. همچنین تحت شرایط یکسان و بعد از القای میزبان‌ها با IPTG، بیشترین بیان پروتئین rhG-CSF در سویه Origami E. coli مشاهده گردید. <br><b>نتیجه گیری: </b>نتایج این مطالعه نشان داد که سویه E. coli Origami سویه مناسبی جهت بیان G-CSF انسانی می‌باشد و این سویه می‌تواند به عنوان یک میزبان مناسب جهت بیان این پروتئین در مقیاس بالاتر پیشنهاد گردد. </div> <b>Aims and Background:</b> Human granulocyte colony stimulating factor (hG-CSF) is a hematopoietic cytokine that stimulates activation of mature blood cells. Nowadays, recombinant hG-CSF is successfully used for the treatment of neutropenia in patients suffering from cancer of myeloid suppressor, bone marrow transplant, acute myeloid leukemia and acute/severe neutropenia. The aim of this study was the increased expression of hG-CSF and production of the soluble protein with disulfide bonds by E.coli strains (Origami and BL21). <br><b>Materials and Methods:</b> The synthesized hG-CSF gene (in pGEM vector) was subcloned into pET23a expression vector and then the recombinant plasmid was transformed into Origami and BL21 hosts. Afterwards, expression levels were compared in two hosts. <br><b>Results:</b> Enzymatic digestion results showed the accuracy of the cloning procedures in vector pET23a. Also under the same conditions and after induction of different hosts with IPTG, best hG-CSF protein expression was observed in strain Origami E.coli.<br><b>Conclusion: </b>The results showed that E.coli (Origami) is appropriate strain for the expression of human G-CSF and this strain can be used as suitable host for the expression of this protein in higher scale. فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت انسانی, پروتئین نوترکیب, بهینه‌سازی کدون, سویه های بیانی اشریشیا‌کلی granulocyte colony stimulating factor (hG-CSF), Recombinant Protein, optimization of codon, E.coli Expression strains 19 23 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-698-2&slc_lang=fa&sid=1 Hamid reza Khatami سید حمید رضا خاتمی 10031947532846004566 10031947532846004566 No Department of Bioscience and Biotechnology, Malek Ashtar University, Tehran, Iran. ژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران Ramin fallah zadeh رامین فلاح‌زاده Raminfallah2009@yahoo.com 10031947532846004567 10031947532846004567 Yes Department of Bioscience and Biotechnology, Malek Ashtar University, Tehran, Iran. ژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران Jalil fallah mehrabadi جلیل فلاح مهرآبادی 10031947532846004568 10031947532846004568 No Department of Bioscience and Biotechnology, Malek Ashtar University, Tehran, Iran. ژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران Mohammad D Ghafari محمد داود غفاری 10031947532846004569 10031947532846004569 No Young Researchers and Elites Club , North Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال، باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، تهران، ایران