fa رایزوپوس اوریزا تثبیت‌یافته بر لوفا اسفنجی و نقش آن در تولید لیپاز درون‌سلولی سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <div align="justify" style="direction: rtl"> <b>سابقه و اهداف:</b> آنزیم لیپاز (EC.3.1.1.3) به عنوان عضوی از گروه کربوکسیلیک استر هیدرولازها، کاتالیز آبکافتی تری‌آسیل‌گلیسرول را جهت آزاد سازی اسیدهای چرب، گلیسریدها و گلیسرول به عهده دارد. با شناخت توانایی لیپاز جهت کاتالیز واکنش استریفیکاسیون، فصل گسترده‌ای در زمینه کارایی‌های این آنزیم آغاز شده است. قارچ رایزوپوس اوریزا، از جمله منابع میکروبی شناخته شده در تولید آنزیم لیپاز است. تمرکز مطالعه حاضر بر روی تعیین زمان بهینه رشد قارچ جهت تولید و نگه‌داشت آنزیم لیپاز درون‌-سلولی است و همچنین فعالیت استریفیکاسیون سلول‌های کشت یافته به فرم آزاد و تثبیت‌یافته مقایسه شد. بیوکاتالیست سلولی تولیدی جهت کاتالیز واکنش سنتز استر نرمال-بوتانول و اولئیک اسید تنظیم شد و پیشرفت واکنش مذکور در حضور و عدم حضور غربال‌های مولکولی مورد بررسی قرار گرفت. <br><b>مواد و روش‌ها: </b>سلول‌های رایزوپوس اوریزا تثبیت‌یافته بر پایه لوفای اسفنجی جهت مقایسه با فرم کشت آزاد سلول تهیه شد. سنجش فعالیت استریفیکاسیون از روش کدورت‌سنجی و با تعیین میزان اسید چرب با‌قی مانده در محلول واکنش انجام ‌شد. <br><b>یافته‌ها: </b> بر طبق سنجش‌های انجام شده بیوکاتالیست سلولی به هر دو فرم تثبیت‌یافته و آزاد در زمان کشت 48 ساعت حداکثر فعالیت استریفیکاسیون ‌دارند. همچنین تثبیت سلولی سبب افزایش فعالیت استریفیماسیون سلولی می‌شود (4 برابر). ماکزیمم بازده تولید استر پس از برقراری تعادل در 9 ساعت %86 گزارش شده است که در حضور غربال‌های مولکولی این بازده تا %96 بهبود می‌یابد. <br><b>نتیجه‌گیری: </b>تثبیت سلولی اثر به سزایی در بهبود فعالیت سنتزی آنزیم لیپاز درون سلولی دارد. هم چنین زمان کشت سلول از اهمیت ویژهای در تعیین میزان ترشح آنزیم لیپاز به خارج از سلول برخوردار است. حذف آب توسط غربال‌های مولکولی یک روش مناسب جهت افزایش بازده فرایندهای استریفیکاسیون است. </div> <b>Aim and background:</b> lipase is a carboxylic ester hydrolase enzyme (EC.3.1.1.3), which acts on triglycerides to release fatty acids, monoglycerides, diglycerides and glycerol. With respect to the biological process advantages against chemical process plus the ability of lipase to catalyze the revers reaction (i.e., esterification) a vast chapter on this enzyme scientific applications was started. The focusing point in this study was to determine the optimum cultivation time for free and immobilized form of Rhizopus oryzae with regard to producing membrane-bound lipase. With the usage of n-butanol and oleic acid in a non-polar environment (n-hexane as solvent) the esterification reaction was carried out while the effect of molecular sieves on the final yield was considered. <br><b>Materials and methods: </b>Rhizopus oryzae cells in the form of immobilized on cellulose support particles or free cells are used as a whole cell bicatalyst. Colorimetric method was used for measuring the esterification activity (i.e., determination of residual free fatty acid in reaction media). <br> <b>Results:</b> Membrane-bound lipasees which are produced by both, immobilized and free form of the cell reach their maximum activity after 48 hour. Also the biocatalyst esterification activity was improved approximately 4-folds by the immobilization of fungal cell on loofa sponge. More than 96% efficiency was gained in synthesis of 1-butyl-oleate ester in the presence of 4 g molecular sieve. <br><b>Conclusion:</b> Immobilization could improve the membrane-bound lipase esterification activity. The lipase secretion to the culture media significantly affected by cultivation time. To reach a complete esterification reaction (approximately 100%), water adsorption with use of molecular sieve is an appropriate method. رایزوپوس اوریزا- لوفا اسفنجی- لیپاز درون سلولی – غربال‌های مولکولی آب– بوتیل اولئات Rhizopus oryzae – loofa sponge– butylolaete – membrane-bound lipase – Molecular sieves 24 31 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-576-1&slc_lang=fa&sid=1 Hoda Khesali Aghtaei هدی خصالی اقطاعی H.Khesali@aut.ac.ir 10031947532846004629 10031947532846004629 No Engineering-Biotechnology, Amirkabir University گروه مهندسی شیمی بیوتکنولوژی، دانشگاه صنعتی امیرکبیر، تهران، ایران Samaneh Sattari سمانه ستاری 10031947532846004630 10031947532846004630 No Chemical Engineering-Food Industry, Amirkabir University گروه مهندسی شیمی صنایع غذایی، دانشگاه صنعتی امیرکبیر ،تهران، ایران Farzaneh Vahabzadeh فرزانه وها‌بزاده Far@aut.ac.ir 10031947532846004631 10031947532846004631 Yes Faculty of Chemical Engineering Amirkabir University گروه مهندسی شیمی بیوتکنولوژی- صنایع غذایی، دانشگاه صنعتی امیرکبیر ،تهران، ایران