New Cellularand Molecular Biotechnology Journal

fa بررسی بیان نشانگرهای‌ اختصاصی پرتوانی Oct4 و Nanog در بلاستوسیست‌های موش حاصل از لقاح آزمایشگاهی Expression Levels of Pluripotency Specific Markers, Oct4 and Nanog in IVF derived Mouse Blastocysts جنین شناسی Embryology مقاله پژوهشی Research Article  سابقه و هدف: اگرچه امروزه IVF به عنوان یک تکنیک پرکاربرد در درمان ناباروری میباشد، اما مطابق مطالعات صورت گرفته، استرس ایجاد شده به واسطهی تغییرات اسمزی، اکسیژن، دما و pH در شرایط خارج از رحم میتواند باعث تغییرات مورفولوژیکی، ژنتیکی و اپیژنتیکی در جنینهای برونتنی نسبت به حالت درونتنی گردد. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر IVF بر کیفیت جنینها از طریق ارزیابی نرخ زندهمانی و رشد و همچنین بررسی میزان بیان ژنهایOct4  و Nanog موثر در پرتوانی توده سلولی داخلی بلاستوسیست میباشد مواد و روش ها: در این آزمایش بلاستوسیستهای 5/4-5/3 روزهی موش در دو گروه بررسی شدند. در گروه تیمار    بلاستوسیستهای برونتنی با گذشت 100 ساعت از لقاح اسپرم و تخمک حاصل گشتند. بلاستوسیستهای درونتنی تیمار نشده نیز به عنوان گروه کنترل در نظر گرفته شدند. در هر دو گروه، نرخ زندهمانی و میزان خروج بلاستوسیستها از زونا و همچنین میزان بیان ژن Oct4، و Nanog، توسط تکنیک Real-time PCR بررسی شدند. یافته ها: اگرچه میزان خروج بلاستوسیست از زونا نسبت به کنترل دارای کاهش معنیداری بود (40/10± 73/67% در مقابل   80/5± 88/86%) اما میزان زندهمانی در بلاستوسیستهای برونتنی مانند گروه کنترل همچنان 100% باقی ماند. همچنین بیان    ژنهای Nanog و Oct4 در بلاستوسیستهای برونتنی نسبت به گروه کنترل دارای افزایش بود. بحث: این مطالعه نشان داد که لقاح آزمایشگاهی میتواند بر خروج بلاستوسیست از زونا و بیان ژن تغییر ایجاد کند. نتیجه گیری:با توجه به نتایج حاصل، لقاح آزمایشگاهی میتواند باعث تغییر بیان ژن و کیفیت در رویان گردد. Aims and Background: Since the birth of the first baby using In vitro fertilization (IVF) in 1978, huge changes have been established in the field of reproductive biology and infertility treatment. Although IVF is considered as a useful technique, but studies have shown that during IVF, some stresses induced by osmosis, oxygen, temperature and pH changes in ectopic conditions can cause morphological, genetic and epigenetic changes in embryos derived from IVF compared to the In vivo. The purpose of this study was to assess the effect of IVF in embryo quality regarding the survival and hatching rates and the expression level of Oct4 and Nanog genes. These genes are effective in the pluripotency of blastocyst inner cell mass. Materials and Methods: In this experiment 3.5 to 4.5 days old mouse blastocysts were studied in two groups. In treated group, In vitro blastocysts were obtained by passing 100 hours after In vitro fertilization of sperms and oocytes. Fresh blastocysts were also considered as control group. Survival and hatching rates and also Oct4 and Nanog genes expression level were evaluated using Real Time PCR technique in both groups. Results: Although the hatching rate of blastocysts decreased significantly in treated group (67.73 ± 5.80 vs. 86.88 ± 10.40%), the survival rate was remained 100% as well. In addition Oct4 and Nanog genes expression level was significantly increased in, In vitro blastocyst compared to the control group. Conclusion: According to the results, in vitro fertilization can change gene expression and quality in the embryo. لقاح آزمایشگاهی, بلاستوسیست, Oct4, Nanog , Real Time PCR IVF, Blastocyst, Oct4, Nanog, Real Time PCR 65 72 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-804-2&slc_lang=fa&sid=1 Ghazaleh Zandi غزاله زندی 10031947532846005804 10031947532846005804 No Department of Genetics, Zanjan Branch, Islamic Azad University, Zanjan, Iran گروه ژنتیک، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد زنجان، زنجان، ایران Mojtaba Dashtizad مجتبی دشتی‌زاد dashtizad@nigeb.ac.ir 10031947532846005805 10031947532846005805 Yes Department of Animal Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran گروه زیست فناوری دام، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران ___ Golnaz Asaadi Tehrani گلناز اسعدی تهرانی1 10031947532846005806 10031947532846005806 No Department of Genetics, Zanjan Branch, Islamic Azad University, Zanjan, Iran گروه ژنتیک، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد زنجان، زنجان، ایران Mehdi Shamsara مهدی شمس‌آراء 10031947532846005807 10031947532846005807 No Department of Animal Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran گروه زیست فناوری دام، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران ___