fa بررسی بیان تومورمارکر سیتوکراتین 19 در رده های سلولی لومینال Aسرطان پستان سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <p dir="RTL"><strong>سابقه و هدف</strong>: سیتوکراتین ها (<span dir="LTR">CKs</span>) بزرگترین زیرگروه پروتئین های رشته ای بینابینی می باشند که در حین سرطانی شدن پروفایل اصلی بیانشان مرتب دچار تغییر می شود . سیتوکراتین 19 (<span dir="LTR">CK19</span>) یکی از پروتئین های مهم اسکلت سلول&shy;های اپی تلیالی است که به عنوان مارکر سلول اپی تلیالی در بیش از 90% سرطان های پستان دیده می شود. در این پژوهش بیان مارکر <span dir="LTR">CK19</span> در رده های سلولی لومینال <span dir="LTR">A</span> &nbsp;با روش <span dir="LTR">Real-time PCR (Polymerase Chain Reaction)</span> &nbsp;بررسی شده است.</p> <p dir="RTL"><strong>مواد و روش ها</strong>: رده های سلولی<span dir="LTR">MCF7</span> و <span dir="LTR">T47D</span> که رده های سلولی سرطان پستان می باشند خریداری و طبق پروتکل مربوطه کشت داده شدند. پس از شمارش و جمع آوری، <span dir="LTR">RNA</span> آن ها استخراج شد. <span dir="LTR">RNA</span> حاصله برای ژن های <span dir="LTR">Glyceraldehyde 3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH)</span> &nbsp;&nbsp;به عنوان ژن مرجع و سیتوکراتین 19 (<span dir="LTR">CK19</span>) به عنوان ژن هدف با روش <span dir="LTR">Real time PCR</span> تکثیر شد. از روش <span dir="LTR">∆∆C_t</span> برای کمی کردن بیان <span dir="LTR">CK19</span> استفاده شد به این صورت که ابتدا &nbsp;<span dir="LTR">∆C_t</span> برای <span dir="LTR">GAPDH</span> و <span dir="LTR">CK19</span> در هر رده سلولی به طور جداگانه محاسبه شد و سپس با توجه به <span dir="LTR">∆C_t</span>&nbsp;&nbsp;نمونه کالیبراتور &nbsp;بیان ژن هدف به طور کمی گزارش گردید.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته ها</strong><strong>:</strong> روش فوق قادراست بیان تومور مارکر <span dir="LTR">CK19</span> را در سلول ها گزارش کند. از طرف دیگر، این تومور مارکر در رده های سلولی<span dir="LTR">MCF7</span> و <span dir="LTR">T47D</span> بیان یکسانی را نشان داد.</p> <p dir="RTL"><strong>نتیجه گیری</strong><strong>:</strong> بیان تومور مارکر <span dir="LTR">CK19</span> در رده های سلولی لومینال <span dir="LTR">A</span> به طور تقریبی به یک میزان می باشد. &nbsp;طبقه بندی رده های سلولی به کمک مارکر های مولکولی می تواند در تحقیقات سرطانی از اهمیت به سزایی برخوردار بوده و در جهت شناسایی و درمان این بیماری رهگشا باشد .</p> <p dir="RTL"><strong>کلمات کلیدی</strong> : سرطان پستان، سیتوکراتین، رده سلولی، لومینال <span dir="LTR">A</span></p> <p dir="ltr" style="text-align: justify;"><strong>Aim and Background:</strong> Cytokeratins (CKs) constitute the largest intermediate filamentous protein that during the development of malignancy, the original CK profile of the cell is frequently variable. Cytokeratin 19 (CK19) is known as an epithelial cell marker and CK19 expression was seen in more than 90% of breast cancers. In this study, CK19 mRNA expression by the real-time PCR (Polymerase Chain Reaction) in luminal A cell lines was assessed.</p> <p dir="ltr" style="text-align: justify;"><strong>Materials and </strong><strong>Methods: </strong>MCF7 and T47D breast cancer cell lines were purchased and cultured according to the recommended protocols. The cells were collected, counted and RNA was extracted from cell lines. The mRNA of CK19 as the target gene and GAPDH (Glyceraldehyde 3-phosphate Dehydrogenase) as a reference gene by real-time PCR was amplified. Quantitative CK19 expression was calculated using the ∆∆C_t method. The average ∆C_tof CK19 and GAPDH was calculated in each cell line as well as the ∆C_t of GAPDH as a calibrator in different cell lines was quantitatively reported<span dir="RTL">.</span></p> <p dir="ltr" style="text-align: justify;"><strong>Results:</strong> This method can be used for detection of CK19 tumor marker expression, in the cells. On the other hand, the same expression in the MCF7 and T47D breast cancer cell lines was shown.</p> <p dir="ltr" style="text-align: justify;"><strong>Conclusions:</strong> Expression of CK19 is the same, in the luminal A breast cancer cell lines. Molecular markers could be used for cell Lines classification which is significant in breast cancer research and it is helpful in detection and treatment of the disease.</p> سرطان پستان, سیتوکراتین, رده سلولی, لومینال A Breast cancer, cytokeratin, cell line, luminal A 19 24 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-915-2&slc_lang=fa&sid=1 Reihaneh Soleimani ریحانه سلیمانی 10031947532846006034 10031947532846006034 No Department of Molecular Biology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بخش بیولوژی مولکولی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Mana Oloomi مانا علومی manaoloomi@yahoo.com 10031947532846006035 10031947532846006035 Yes Department of Molecular Biology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بخش بیولوژی مولکولی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Reza Mahdian رضا مهدیان 10031947532846006036 10031947532846006036 No Department of Biotechnology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بخش بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Saeideh Keyvani-Ghamsari سعیده کیوانی قمصری 10031947532846006037 10031947532846006037 No Department of Molecular Biology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بخش بیولوژی مولکولی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Nasrin Karimi نسرین کریمی 10031947532846006038 10031947532846006038 No Department of Molecular Biology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بخش بیولوژی مولکولی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران