New Cellularand Molecular Biotechnology Journal

fa بررسی بنیادینگی سلول‌ های مزانشیمی ژله وارتون بند ناف در طی تمایز به سلول‌های مشابه جرم Assessment of Stemness in mesenchymal cells of human umbilical cord warton’s-jelly during differentiation to germ-like cells سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article سابقه و هدف: عوامل مختلفی مانند بیماری های مقاربتی، ضایعه های نخاعی و پرتودرمانی پس از ابتلا به سرطان های مختلف، که نتیجه ی آن ها تولید ناکافی یا عدم تولید اسپرماتوزوئید می باشد، منجر به ناباروری در مردان می شوند. امروزه با ایجاد فناوری سلول درمانی با سلول های بنیادی مزانشیمی، درمان بسیاری از بیماری ها امکان پذیر شده است. در این بین، سلول های بنیادی مزانشیمی ژله ی وارتون بند ناف انسان، به عنوان منبعی که به فراوانی در دسترس بوده و توسط سیستم ایمنی فرد پس زده نمی شوند، مورد توجه قرار گرفته اند. نخستین قدم در استفاده از این سلول ها، اثبات بنیادی بودن آن است. لذا در این مطالعه  به لحاظ مولکولی بنیادینگی این سلول ها با بررسی بیان ژن های ,CD34  CD105و CD44 بررسی شد. مواد و روش ها: سلول های بنیادی از منطقه ژله وارتون بندناف جداسازی و کشت داده شدند، استخراج تمامی RNA از پاساژ سوم صورت گرفته و پس از سنتز cDNA، بیان ژن های بنیادی به روش RT-PCR بررسی شد. سپس سلول های مزانشیمی در معرض دوزهای مختلف BMP4 و نیز محیط کشت شرایطی شده به دست آمده از سلول های بیضه ای موشهای نوزاد و نیز بستر نانوفایبر PLLA قرار گرفتند تا تمایز آن ها به سلول های مشابه جرم مورد بررسی قرار گیرد. یافته ها: نتایج نشان داد که این سلول ها از پتانسیل تکثیری قابل توجهی برخوردارند و ژن های CD105 , CD44 را قبل از تمایز بیان می کنند ولی بیان ژن CD34 که مارکر سلول های هماتوپویتیک می باشد در آن مشاهده نمی شود. قرار دادن سلول ها در معرض محیط تمایزی پس از پاساژ سوم، آن ها را به سمت سلول های مشابه جرم سوق می دهد. نتیجه گیری: کشت آزمایشگاهی و غنی سازی سلول های جرم مشتق از منابع دیگر سلول های بنیادی مانند سلول های مزانشیمی بند ناف یک روش عملی برای تحقیق های اولیه ی رشد و نمو سلول های جرم است. سلول های بنیادی بندناف با بیان ژن های بنیادی، به عنوان یک استراتژی، برای درمان ناباروری می تواند مورد استفاده قرار گیرد. Aim and Background: Various factors, such as sexual diseases, spinal cord injuries and radiotherapy after cancers, cause insufficient or lack of sperm production and lead to men infertility. Today, treatment of many diseases has been made possible by therapeutic cell technology with mesenchymal stem cells. Meanwhile, mesenchymal stem cells of human umbilical cord Wharton's Jelly, have been considered as a source that is abundantly available and not rejected by immune system. The first step in using these cells is to confirm they are stem cells. Therefore, in this study stemness of these cells were investigated by expression of CD34, CD44, CD105 genes. Method: Stem cells were isolated from umbilical cord Wharton's jelly and cultured. Total RNA was extracted from cells of the third passage. After synthesis of cDNA, expression of some genes was evaluated by RT-PCR technique. The mesenchymal stem cells were exposed to different doses of BMP4, conditioned medium obtained from testicular cells of newborn mice and a layer of PLLA Nanofiber. Then differentiation of mesenchymal stem cells to germ-like cells was evaluated by different techniques. Results: The results showed that these cells have considerable potential for proliferation and expression of CD105, CD44 genes before differentiation, but the expression of CD34 gene, a marker for hematopoietic cells, was not seen. The exposure of these cells to differentiation medium after the third passage, leads them toward germ-like cells. Discussion: Laboratory culture and proliferation of germ-like cells derived from other sources of stem cells such as umbilical cord Wharton's Jelly is a new method for initial research about develop<a name="_GoBack"></a>ment of germ cells. Umbilical cord stem cells with expression of stemness specific genes can be used for treatment of men infertility as a new strategy. سلول های بنیادی مزانشیمی, ناباروری, سلول جرم Mesenchymal Stem Cells, Infertility, Germ Cell 25 32 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-217-3&slc_lang=fa&sid=1 Zeynab Abdollahi زینب عبدالهی 10031947532846006039 10031947532846006039 No Department of Biology, Faculty of Science, University of Mohaghegh Ardabili, Ardabil, Iran گروه زیست شناسی ، دانشکده علوم، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران Tooba Mirzapour طوبا میرزاپور Dr.tooba72@gmail.com 10031947532846006040 10031947532846006040 Yes Department of Biology, Faculty of Science, University of Mohaghegh Ardabili, Ardabil, Iran گروه زیست شناسی ، دانشکده علوم، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران Abolfazl Bayrami ابوالفضل بایرامی 10031947532846006041 10031947532846006041 No Department of Biology, Faculty of Science, University of Mohaghegh Ardabili, Ardabil, Iran گروه زیست شناسی ، دانشکده علوم، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران Saber Zahri صابر زهری 10031947532846006042 10031947532846006042 No Department of Biology, Faculty of Science, University of Mohaghegh Ardabili, Ardabil, Iran گروه زیست شناسی ، دانشکده علوم، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران Fariba Goudarzi فریبا گودرزی 10031947532846006043 10031947532846006043 No Department of Biology, Faculty of Science, University of Mohaghegh Ardabili, Ardabil, Iran گروه زیست شناسی ، دانشکده علوم، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران