نجمه یارکه سلخوری، تقی ناصر پور فریور، جمیله نوروزی، رضا نجفی پور، پرویز پاکزاد، صفر علی علیزاده،
دوره ۱۴، شماره ۵۳ - ( ۱۰-۱۴۰۲ )
چکیده
سابقه و هدف: ویروس درمانی انکولیتیک به‌عنوان راهکاری نویدبخش برای درمان سرطان شناخته میشود. ویروسهای انکولیتیک مانند آدنوویروس‌ها قادرند در سلولهای سرطانی تکثیر و آنها را متلاشی کنند. آدنوویروس سروتیپ ۵ ازطریق گیرنده کوکساکی- آدنوویروس به سطح سلولهای میزبان متصل میشود. میزان بیان این گیرنده در سطح سلولهای سرطانی بسیار متغییر است. هدف از این مطالعه، ساخت آدنوویروس انکولیتیک با ویژگی انتخابی بالا برای سلولهای آدنوکارسینومای معده(AGS) بوده که قادرند در این سلولها تکثیر و آنها را تخریب کنند.
مواد و روش ها: در مطالعه تجربی حاضر، توالی اکتروتات در ناحیهHI-loop فیبرآدنوویروس کلون گردید و بدین ترتیب وکتورهای نوترکیب pAd۵TATE(wt)و pAd۵TATE(ΔE۱,ΔE۳) ساخته شدند. وکتور pAdZ-TATE(wt) با استفاده از سیستم کلونینگ pADZ سنتز شد. ذرات ویروسی نوترکیب Ad۵TATE(wt) و Ad۵TATE(ΔE۱,ΔE۳) سنتز شد و در سلول های HEK۲۹۳ تکثیر شد. با استفاده از روش کلسیم فسفات، وکتورهای نوترکیب به رده سلولیHEK۲۹۳ منتقل و بدین ترتیب ذرات ویروسی جدید تولید شد. رده سلولی AGS با ویروس Ad۵(wt) و Ad۵TATE(wt) آلوده شدند و در زمانهای مختلف، بروز اثرات تخریب سلولی در این سلولها بررسی شد. با استفاده از آزمونMTT، میزان بقای سلولی در رده سلولی AGS تیمار شده با ویروس نوترکیب بررسی گردید.
یافته ها: اثرات تخریب سلولی(CPE) در کمتر از ۱۸ ساعت شروع و ۷۲ ساعت بعد از آلودگی کامل گردید. تیتر ویروسهای نوترکیب با روش TCID۵۰ برابر۱۰۷ (برای Lµ ۱۰۰ از محلول ویروسی) محاسبه شد. همچنین تیتر ویروس Ad۵TATE(ΔE۱,ΔE۳) با روش TCID۵۰ برابر TCID۵۰/ml ۱۰۷ بود. نتایج نشانداد، Ad۵TATE(wt) در مقایسه باAd۵(wt) ، توانایی آلوده‌سازی سلولهای رده AGS را دارد. نتایج حاصل از آزمون MTT نشان داد، با افزایش غلظت ذرات ویروسی و زمان نگهداری، تعداد سلولهای زنده AGS به‌طور قابل‌ملاحظه‌ای کاهش یافت.
نتیجه گیری: یافتههای این پژوهش نشان داد، ویروس نوترکیبAd۵TATE(wt) قادر است به صورت اختصاصی سلولهای سرطانی رده سلولی آدنوکارسینوما معده (AGS) را آلوده و پس از تکثیر، آن ها را متلاشی کند. لذا میتوان از ویروس Ad۵TATE(wt) به‌عنوان عامل انکولیتیک علیه سلولهای سرطانی رده سلولی آدنوکارسینوما معده(AGS) استفاده کرد.
