سهراب احمدیوند، مهدی سلطانی، مهدی بهدانی، رضا حسنزاده،
دوره ۹، شماره ۳۶ - ( ۶-۱۳۹۸ )
چکیده
سابقه و هدف: ویروس نکروز عفونی پانکراس (IPNV)عامل بیماری واگیردار IPN است که باعث تلفات شدید در گونههای مختلف آبزیان میگردد. این مطالعه با هدف ساخت و ارزیابی واکسن DNA علیه بیماری IPN در قزل آلا انجام گردیده است.
مواد و روش ها : در مطالعه حاضر واکسن DNA با استفاده از کد کردن آنتی ژن (VP۲) سویه بومی ویروس IPNV در وکتور یوکاریوتیpcDNA ۳,۱ حاوی پروموتور سیتومگالوویروس(CMV) ایجاد و توسط باکتری E. coliکلون گردید. تایید حضور آنتی ژن VP۲در وکتور و صحت واکنش لیگاسیون با استفاده از هضم آنزیمی توسط آنزیم های Hind III و XhoI صورت گرفت. کارایی واکسن DNAدر بچه ماهیان قزل آلا با استفاده از تزریق عضلانی دوز های ۲، ۵ و۱۰ میکروگرم پلاسمید حاوی توالی آنتی ژن ارزیابی گردید. بیان آنتی ژن در بافت طحال ماهیان واکسینه شده و هم چنین قابلیت ایمنی زایی و کاهش بار ویروسی در ماهیان بازمانده از عفونت تجربی با استفاده از بیان ژن IPNV-VP۴ بررسی گردید.
یافته ها: حضور آنتی ژن تجویز شده ۳۰ روز بعد از واکسیناسیون در بافت طحال ماهیان با استفاده واکنش RT-PCR تایید گردید. هم چنین بیان نسبی ژن IPNV-VP۴ (مارکر بار ویروسی) در بافت طحال و کلیه ماهیان واکسینه شده بازمانده در ۴۵ روز بعد از عفونت تجربی به طور معنی داری پایینتر از گروه های کنترل بود.
نتیجه گیری: این پژوهش نشان میدهد که واکسنDNA ساخته شده میتواند باعث ایمنی زایی قزلآلا علیه ویروسIPNV و کاهش بار ویروسی در ماهیان بازمانده از بیماری و متعاقبا مانع از ایجاد حاملین بدون علائم بالینی و انتشار ویروس گردد.