شکوفه رضایی، احمدفرهاد طالبی،
دوره ۱۰، شماره ۳۸ - ( ۱-۱۳۹۹ )
چکیده
امروزه با استفاده از مهندسی ژنتیک، پروتئینهای نوترکیب می‌توانند در حجم انبوه، کیفیت مطلوب و هزینه پایین برای پاسخگویی به خواسته‌های صنایع مختلف تولید شوند. پروتئینهای نوترکیب می‌توانند در روشهای بیانی مختلفی نظیر سیستمهای بیانی عاری از سلول یا بر پایه سلولهای پروکاریوتی یا یوکاروتی بیان شوند. با توجه به مزایای استفاده از سلولهای پروکاریوتی، یکی از سیستمهای متداول برای تولید پروتئینهای نوترکیب، استفاده از باکتری اشریشیاکلی (E.coli) است. هدف از مطالعه حاضر بررسی دقیقتر بیان پروتئین نوترکیب در باکتری E. coli و ارائه راهکارهای مناسب برای دستیابی به کشت با تراکم سلولی بالا و با قابلیت بیان بیشینه است. از این رو با مطالعه حدود ۶۳ مقاله چاپ شده در زمینه مهندسی ژنتیک، سیستمهای بیانی گوناگون برای تولید پروتئینهای نوترکیب معرفی و سپس راهکارهای عمومی برای بیان بالاتر آنها بررسی شدند. رویکردهای متعددی برای افزایش بازدهی و حلالیت بهکار گرفته شده است؛ تغییر سرعت سنتز پروتئینها، استفاده از پروتئینهای اتصالی، موتاسیون در پروتئین هدف، بیان همزمان چاپرونهای ملکولی و بهینه سازی شرایط کشت از جمله روشهایی است که در این مطالعه ارزیابی شدهاند. کلونینگ مجازی در بستر توسعه روشهای نرمافزاری و پایگاههای اطلاعاتی غنیتر به کمک ابزار و آزمونهای آزمایشگاهی آمده و توانسته است به رفع محدودیتهای بیان نوترکیب پروتئینها در میزبانهایی با سیستم بیانی متفاوت منجر شود.
