New Cellularand Molecular Biotechnology Journal

fa بررسی تأثیر ایمونوتوکسین نوترکیب حاوی سم ریسین بر روی بیان ژن‌های آپوپتوزی BAX و BCL-2 در رده‌های سلولی سرطان کلورکتال و پستان The effect of a recombinant immunotoxin containing ricin toxin on the expression of apoptotic genes BAX and BCL-2 in colorectal and breast cancer cell lines فیزیولوژی Physiology مقاله پژوهشی Research Article سابقه و هدف: بیماری سرطان به طور عمده بهدلیل اختلال در تنظیم مرگ سلولی برنامهریزیشده است. از طرفی بیان بیش از حد<a href="#_ftn1" name="_ftnref1" title="">[1]</a> EGFR بر روی سطح بسیاری از سلولهای بدخیم ثابت شده است. از اینرو ایمونوتوکسین<a href="#_ftn2" name="_ftnref2" title="">[2]</a> بر علیه EGFR، که حاوی یک آنتیبادی یا یک قطعه از آنتیبادی متصل شده به یک مولکول سمی است، از قابل اعتمادترین راهبردها برای درمان سرطان است. در اینجا ما تأثیر یک مولکول جدید ایمونوتوکسین حاوی سم ریسین<a href="#_ftn3" name="_ftnref3" title="">[3]</a> بر روی سطح mRNA دو مولکول اصلی آپوپتوز در ردههای سلولهای سرطانی را بررسی کردیم. مواد و روش ها<a>:</a>  تأثیر مولکول ایمونوتوکسین <a class="msocomanchor" href="#_msocom_1" id="_anchor_1" language="JavaScript" name="_msoanchor_1" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_1')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_1','_com_1')">[M1]</a> <a class="msocomanchor" href="#_msocom_2" id="_anchor_2" language="JavaScript" name="_msoanchor_2" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_2')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_2','_com_2')">[s2]</a> و اجزاء آن شامل سم ریسین و قطعه آنتیبادی بر روی <a>سطح </a>mRNA<a class="msocomanchor" href="#_msocom_3" id="_anchor_3" language="JavaScript" name="_msoanchor_3" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_3')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_3','_com_3')">[M3]</a>   ژنهای پروآپوپتوتیک <a>BAX</a><a class="msocomanchor" href="#_msocom_4" id="_anchor_4" language="JavaScript" name="_msoanchor_4" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_4')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_4','_com_4')">[M4]</a>  و آنتیآپوپتوتیک BCL-2 و ژن گیرنده EGF، در رده سلولهای سرطان پستان MDA-MB-468 و کلورکتال HCT116 با استفاده از <a href="#_ftn4" name="_ftnref4" title="">[4]</a>(qRT-PCR) انجام شد. از گلیسرآلدئید 3- فسفات دهیدروژناز بهعنوان ژن مرجع استفاده شد. یافته ها:  <a>تیمار</a><a class="msocomanchor" href="#_msocom_5" id="_anchor_5" language="JavaScript" name="_msoanchor_5" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_5')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_5','_com_5')">[M5]</a>  با ایمونوتوکسین موجب افزایش معنیدار (05/0>P) بیان ژن BAX  و کاهش بیان ژنهای EGFR و BCL-2  و القاء آپوپتوز شد. همچنین سم ریسین باعث کاهش معنیدار BCL-2 و عدم افزایش معنیدار BAX در سلولهای سرطانی و کاهش معنیدار EGFR تنها در سلولهای سرطان پستان شد. بخش scFv<a href="#_ftn5" name="_ftnref5" title="">[5]</a> تغییرهای معنیداری بر بیان ژنها نداشت. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که پروتئین نوترکیب پانیتومومب-ریسین، میتواند کاندید مناسب برای درمان سرطانهایی با بیان بیش از حد عامل رشد اپیدرمی بهوسیله القاء مسیر آپوپتوز باشد. <div>  <hr align="left" size="1" width="33%" > <div id="ftn1"><a href="#_ftnref1" name="_ftn1" title="">[1]</a> Epidermal Growth Factor Receptor</div> <div id="ftn2"><a href="#_ftnref2" name="_ftn2" title="">[2]</a> Immunotoxin</div> <div id="ftn3"><a href="#_ftnref3" name="_ftn3" title="">[3]</a> Ricin Toxin</div> <div id="ftn4"><a href="#_ftnref4" name="_ftn4" title="">[4]</a> Real time quantitative PCR</div> <div id="ftn5"><a href="#_ftnref5" name="_ftn5" title="">[5]</a> Single Chain Fragment Variable</div> </div> <div> <hr align="left" class="msocomoff" size="1" width="33%" > <div> <div class="msocomtxt" id="_com_1" language="JavaScript" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_1')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_1','_com_1')"><a name="_msocom_1"></a> <a class="msocomoff" href="#_msoanchor_1">[M1]</a>خیلی خلاصه است</div> </div> <div> <div class="msocomtxt" id="_com_2" language="JavaScript" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_2')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_2','_com_2')"><a name="_msocom_2"></a> <a class="msocomoff" href="#_msoanchor_2">[s2]</a></div> </div> <div> <div class="msocomtxt" id="_com_3" language="JavaScript" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_3')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_3','_com_3')"><a name="_msocom_3"></a> <a class="msocomoff" href="#_msoanchor_3">[M3]</a>رده سلولی؟</div> </div> <div> <div class="msocomtxt" id="_com_4" language="JavaScript" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_4')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_4','_com_4')"><a name="_msocom_4"></a> <a class="msocomoff" href="#_msoanchor_4">[M4]</a>گروه های ارزیابی و نوع تیمارها باید اشاره گردد!</div> </div> <div> <div class="msocomtxt" id="_com_5" language="JavaScript" on<illegal tag>mouseout="msoCommentHide('_com_5')" on<illegal tag>mouseover="msoCommentShow('_anchor_5','_com_5')"><a name="_msocom_5"></a> <a class="msocomoff" href="#_msoanchor_5">[M5]</a>تیمار ایمونوتوکسین؟!!</div> </div> </div> Aim and background: Cancer is mainly caused by defect in natural regulation of programmed cell death (PCD). On the other hand, it is proved that, the EGFR is overexpressed on the surface of many malignant cell. Therefore, immunotoxin against EGFR, which consisting an antibody or fragment of an antibody linked to the toxic moiety is one of the most reliable strategies for cancer treatment. Here we evaluate the effect of a novel immunotoxin molecule harboring ricin, as a toxic moiety on the mRNA level of two main apoptotic molecules on cancerous cell lines. Materials and method: The Effects of immunotoxin molecule and it’s components including ricin toxin and antibody fragment on the mRNA level of pro- apoptotic BAX and anti-apoptotic BCL-2 and EGF receptor genes on the breast MDA-MB-468 and colorectal HCT-116 cancer cell lines were assayed by qRT-PCR. We used glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) as a reference gene. Results: Treatment with immunotoxin significantly increased the expression of BAX gene and decreased the expression of EGFR and BCL-2 genes (P<0.05) and induced apoptosis. Also, ricin toxin caused a significant decrease in BCL-2 and no significant increase in BAX in cancer cells and decreased EGFR only in breast cancer cells. The scFv part had no significant changes on genes expression. Conclusion: The present findings showed that the recombinant Panitumumab-Ricin protein, may be an appropriate candidate for the treatment of EGFR overexpressed cancers by induction in apoptosis pathway.   ایمونوتوکسین, آنتی‌بادی, آپوپتوز, گیرنده عامل رشد اپیدرمی, .Iau Science Immunotoxin, Antibody, Apoptosis, Epidermal growth factor receptor,.Iau Science 39 48 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-1827-2&slc_lang=fa&sid=1 Azam Almolok Naemi اعظم الملوک ناعمی 100319475328460013850 100319475328460013850 No Biology department, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات تهران، دانشگاه آزاد اسلامی،تهران، ایران Ali Hatef Salmanian علی هاتف سلمانیان salman@nigeb.ac.ir 100319475328460013851 100319475328460013851 No Department of Agricultural Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran گروه زیست فرآورده‌های کشاورزی، پژوهشکده زیست فناوری کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران Zahra Noormohammadi زهرا نورمحمدی 100319475328460013852 100319475328460013852 Yes Biology department, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات تهران، دانشگاه آزاد اسلامی،تهران، ایران Jafar Amani جعفر امانی 100319475328460013853 100319475328460013853 No Applied Microbiology Research Center, Systems Biology and Poisonings Institute Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran. مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، پژوهشکده سیستم بیولوژی مسمومیت ها، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا..، تهران، ایران