fa مقایسه بازدهی ترانسفکشن وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس وزیکولار استوماتیتیس و دو معرف ترانسفکشن تجاری در رده‌های سلولی HEK-293 و Vero فیزیولوژی Physiology مقاله پژوهشی Research Article <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">سابقه و هدف</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">: تحویل موفقیت آمیز یک ژن به سلول هدف مستلزم ایجاد یک سیستم انتقال ژن ایمن تر و کارآمدتر است</span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">.</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> این مطالعه با هدف ارزیابی کارایی ترانسفکشن وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس وزیکولار استوماتیتیس </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">(VSV)</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> به عنوان یک نانوحامل هیبریدی در مقایسه با دو معرف ترانسفکشن تجاری از جمله لیپوفکتامین 2000 و </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">GenJet^&trade;</span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در دو رده سلولی </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">HEK-293</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">Vero</span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> انجام شد. </span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">مواد و روش &shy;ها</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">: بازدهی ترانسفکشن وایروزوم کاتیونیک </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">VSV</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">، لیپوفکتامین 2000 و </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">GenJet^&trade;</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در دو رده سلولی </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">HEK-293</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> و </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">Vero</span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> با استفاده از ترانسفکشن پلاسمید </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">pEGFP-N1</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">، میکروسکوپ فلورسنت و تکنیک فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین، میزان سمیت وایروزوم کاتیونیک و معرف های تجاری ترانسفکشن به وسیله آزمون </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">MTT</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> بررسی گردید. اثر مهاری </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">NH₄Cl</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> بر روی بازده ترانسفکشن وایروزوم به وسیله میکروسکوپ فلورسنت و فلوسایتومتری آنالیز گردید.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">یافته &shy;ها</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">: یافته&shy;های ما نشان داد که بالاترین سطح بیان </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">EGFP</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در سلول های ترانسفکت شده با لیپوفکتامین 2000 بدست آمد. بازده ترانسفکشن در هر دو رده سلولی ترانسفکت شده با وایروزوم</span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">/</span> <span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">pEGFP-N1</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در مقایسه با </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">pEGFP-N1/GenJet^TM</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> افزایش معنی داری داشت</span></span><a name="_Hlk170550515"><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">) </span></a><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">0.01 > </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">P</span> <span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">,</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> <a name="_Hlk170548489">&nbsp;</a>0.05 ></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">( P </span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">. به علاوه</span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">، نتایج آنالیز زنده مانی سلولی به وسیله </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">MTT</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> با نتایج بدست آمده از ارزیابی بازده ترانسفکشن تطابق داشت. سلول های ترانسفکت شده با لیپوفکتامین 2000 بالاترین میزان زنده مانی را از خود نشان دادند. زنده مانی سلولی در سلول های ترانسفکت شده با وایروزوم کاتیونیک </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">VSV</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> در مقایسه با سلول های ترانسفکت شده با </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">GenJet^&trade;</span><span style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> به طور قابل توجهی بالاتر بود (</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">0.05 ></span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">( P </span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">.</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتایج نشان داد که در سلول&shy;های </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">HEK-293</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> تیمار شده با </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">NH₄Cl</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">، ترانسفکشن مهار گردید. </span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">نتیجه&shy; گیری</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:">: وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">VSV</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> حاوی </span></span><span dir="LTR" new="" roman="" style="font-family:" times="">VSV-G</span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" nazanin="" style="font-family:"> یک نانوحامل هیبریدی کارآمد با تروپیسم سلولی وسیع است که بینشی جدید در مورد کاربرد به عنوان یک سیستم تحویل ژن در مطالعات ژن درمانی ارائه می دهد.</span></span></span></span></span></span></span><br> <br> &nbsp; <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:115%"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span style="font-size:15.0pt"><span style="line-height:115%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Abstract</span></span></span></b></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span style="font-size:12.0pt"><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Aims and Background:</span></span></span></b><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> Successful delivery of a gene to a target cell requires the development of a safer and more efficient gene transfer system. This study aimed to evaluate the transfection efficiency of cationic virosome derived from vesicular stomatitis virus (VSV) as a hybrid nano-carrier compared to two commercial transfection reagents including Lipofectamine^&trade; 2000 and, GenJet^&trade;</span></span> <span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">in HEK-293 and, Vero cell lines.</span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span style="font-size:12.0pt"><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Material and Methods</span></span></span></b><span style="font-size:12.0pt"><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">:</span></span></span><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> The transfection efficiency of VSV cationic virosome, Lipofectamine^&trade; 2000, and GenJet^&trade; was evaluated in HEK-293 and Vero cell lines using pEGFP-N1 plasmid transfection, fluorescent microscopy, and flow cytometry methods. Also, the toxicity of cationic virosome and commercial transfection reagents was investigated by the MTT test. The inhibitory effect of NH₄Cl on virosome transfection efficiency was analyzed by fluorescent microscopy and flow cytometry.</span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span style="font-size:12.0pt"><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Results:</span></span></span></b><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> Our findings showed that the highest level of EGFP expression was obtained in cells transfected with Lipofectamine^&trade; 2000. Transfection efficiency was significantly increased in both cells transfected with virosome/pEGFP-N1 compared to pEGFP-N1/GenJet^&trade; </span></span><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">(<i>P</i>< 0.05, <i>P</i>< 0.01)</span></span><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">. In addition, the results of cell viability analysis by MTT were consistent with the results obtained from the evaluation of transfection efficiency. Cells transfected with lipofectamine^&trade; 2000 showed the highest survival rate. Cell viability was significantly higher in cells transfected with VSV cationic virosomes compared to cells transfected with GenJet^&trade; </span></span><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">(<i>P</i>< 0.05)</span></span><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">.</span></span> <span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">The results showed that transfection was inhibited in HEK-293 cells treated with NH₄Cl.</span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:Calibri,sans-serif"><b><span style="font-size:12.0pt"><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Conclusion:</span></span></span></b><span style="line-height:150%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> VSV-derived cationic virosome containing VSV-G is an efficient hybrid nanocarrier with broad cellular tropism, which provides new insight into its application as a gene delivery system in gene therapy studies.</span></span></span></span></span><br> <br> &nbsp; وایروزوم, ترانسفکشن, نانوحامل, ویروس وزیکولار استوماتیتیس, ژن درمانی, لیپوفکتامین 2000, GenJet™, Iau Science. Virosome, Transfection, Nanocarrier, Vesicular stomatitis virus, Gene therapy, Lipofectamine™ 2000, GenJet™, Iau Science. 41 51 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-1921-2&slc_lang=fa&sid=1 Delaram Ahmadi دلارام احمدی 100319475328460016396 100319475328460016396 No گروه میکروب شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد قم، دانشگاه آزاد اسلامی، قم، ایران Mohsen Zargar محسن زرگر zargar@qom-iau.ac.ir 100319475328460016397 100319475328460016397 Yes Department of Microbiology, Faculty of Basic Science, Qom Branch, Islamic Azad University, Qom, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد قم، دانشگاه آزاد اسلامی، قم، ایران Mohammad Reza Zolfaghari محمدرضا ذوالفقاری 100319475328460016398 100319475328460016398 No گروه میکروب شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد قم، دانشگاه آزاد اسلامی، قم، ایران Monireh Kazemimanesh منیره کاظمی منش 100319475328460016399 100319475328460016399 No بخش ویروس شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Amir Ghaemi امیر قائمی 100319475328460016400 100319475328460016400 No Department of Influenza and other Respiratory Viruses, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran بخش آنفلوانزا و ویروس‌های تنفسی شایع، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران