New Cellularand Molecular Biotechnology Journal

other بررسی بیان‌ژن eaeA در باکتری اشریشیا کلی اِنتروپاتوژنیک در حضور فروکتوز Evaluation of eaeA gene expression in Enteropathogenic Escherichia coli in the presence of fructose سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article سابقه و هدف: اشرشیا کلی اِنتروپاتوژنیک (EPEC) یکی از قدیمی‌ترین پاتوتایپ‌های شناسایی‌شدۀ اشریشیا کلی است که در رودۀ کوچک تکثیر می‌یابد و عامل اسهالِ حاد و غیرخونی در کشورهای درحال توسعه محسوب می‌شود. یکی از عواملِ اصلیِ بیماری‌زاییِ این باکتری، فعالیت ژن eaeA می‌باشد. این مطالعه با هدف بررسیِ بیان‌ژن eaeA این باکتری در حضور فروکتوز، به‌عنوان یک عامل مهارکنندۀ احتمالی بر پایۀ ترکیب‌های قندیِ عسل انجام شد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه، ابتدا 4 جدایۀ باکتریاییِ EPEC کشت داده شدند و پس از استخراجِ DNA، وجود ژن eaeA با استفاده از PCR تأیید شد. سپس استخراج  RNAاز روی محیط‌های کشت همراه با غلظت‌های فروکتوز 2، 5/8، 17 و 34 درصد (Merck, Germany) و نمونۀ کنترل فاقد فروکتوز انجام شد. درنهایت جهت بررسی تأثیر فروکتوز بر بیان‌ژن  eaeAاز تکنیک Real-Time PCR (ABI step one, USA) استفاده شد. یافته ها: نتایج نشان دادند که فروکتوز موردمطالعه تأثیر معنی‌داری بر بیان‌ژن eaeA در  EPECدر غلظت‌های مختلف دارد. میزان بیان‌ژن eaeA در فروکتوز در غلظت 2 درصد اگرچه نسبت به سایر تیمارها بالاتر بود، اما نسبت به گروه کنترل کاهش بیان نشان داد (05/0p<). در غلظت 5/8 و17درصد به‌ترتیب کاهش بیان‌ژن شدیدتر و در غلظت 34 درصد بیان‌ژن به‌طور کامل مهار شد. نتیجه‌گیری: ازآنجایی‌که بیان‌ژن eaeA از مهم‌ترین فاکتورهای ویرولانس و کلونیزاسیون باکتری  EPECمی‌باشد، با توجه به نتایج این پژوهش می‌توان گفت شاید فروکتوز بتواند بر کاهش بیماری‌زاییِ EPEC و بهبود اسهال در کودکان و بزرگسالان مؤثر باشد. همچنین با توجه به نتایج مطالعۀ حاضر می‌توان بیان داشت که مصرف فروکتوز می‌تواند بر کاهش بیماری‌زایی نیز مؤثر باشد. به‌علاوه نتایج نشان دادند که مصرف مستقیم و وابسته به دوز (Dose-dependent) فروکتوز یا داروهای حاویِ آن احتمالاً قادر به مهار فعالیت این ژن در بیماران می‌باشد اما تأیید نهایی نیاز به کارآزمایی‌های بالینی دارد.   Aim and Background Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) is one of the oldest identified pathotypes of Escherichia coli that proliferates in the small intestine and causes acute and  non-bloody diarrhea in developing countries. One of the main causes of pathogenicity of this bacterium  is eaeA gene activity. This study aimed to investigate the expression of the eaeA gene in this bacterium in the presence of fructose as a potential inhibitory factor derived from honey's sugar components. Materials and Methods: In this descriptive cross-sectional study, four isolates of EPEC were first cultured, and the presence of the eaeA gene was confirmed by PCR. Then, RNA extraction was performed on culture media supplemented with fructose concentrations of 2%, 8.5%, 17%, and 34% (Merck, Germany), with a fructose-free sample as a control. Finally, the Real-time PCR technique (ABI StepOne, USA) was used to investigate the effect of fructose on eaeA gene expression. Results: The results showed that the studied fructose had a significant effect on the expression of the eaeA gene in EPEC (p<0.05). While the expression of the eaeA gene at 2% fructose concentration was higher than other treatments, it showed a significant decrease compared to the control group. Gene expression decreased further at 8.5% and 17% concentrations and was completely inhibited at 34% concentration. Conclusion: Since eaeA gene expression is one of the most important virulence factors for EPEC colonization, the results suggest that fructose can effectively reduce EPEC pathogenicity in a dose-dependent manner. According to the results, controlled oral consumption of fructose or fructose-containing products may partially inhibit EPEC activity in patients; however, this requires further clinical trials.   اشریشیا کلی, EPEC, ژن eaeA, فروکتوز. Escherichia coli, EPEC, eaeA gene, Fructose. 61 69 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-61-83&slc_lang=other&sid=1 Nasrin Shakarami نسرین شاکرمی 100319475328460015754 100319475328460015754 No . Department of Biology, Bo. C., Islamic Azad University, Borujerd, Iran. دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه زیست شناسی، واحد بروجرد، دانشگاه آزاد اسلامی، بروجرد، ایران. Mohammad Reza Mehrabi محمدرضا مهرابی 100319475328460015755 100319475328460015755 Yes . Department of Laboratory Science, Bo. C., Islamic Azad University, Borujerd, Iran. استادیار، گروه علوم آزمایشگاهی، واحد بروجرد، دانشگاه آزاد اسلامی، بروجرد، ایران. محسن میرزایی 100319475328460015756 100319475328460015756 No . Department of Laboratory Science, Bo. C., Islamic Azad University, Borujerd, Iran. استادیار، گروه علوم آزمایشگاهی، واحد بروجرد، دانشگاه آزاد اسلامی، بروجرد، ایران. Reza Yari رضا یاری 100319475328460015757 100319475328460015757 No Department of Biology, Medicinal Plants, Health and Food Safety Research Center, Bo. C., Islamic Azad University, Borujerd, Iran. استادیار، گروه زیست شناسی، مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، سلامت و امنیت غذایی، واحد بروجرد، دانشگاه آزاد اسلامی، بروجرد، ایران.