fa بهینه سازی ارگانوژنز نابجا به شیوه‌ی یک و دو مرحله‌ای جهت انتقال ژن به روش آگروباکتریوم به گیاه سیب زمینی (Solanum tuberosum L.) سلولی و مولکولی Cellular and molecular مقاله پژوهشی Research Article <b> سابقه و هدف:</b> سیستم‌های گیاهی دارای پتانسیل‌های بالایی در تولید ایمن، اقتصادی، ارزان و در مقیاس زیاد زیست داروها هستند. گیاه سیب زمینی یک بیورآکتور مناسب و گزینه‌ی بسیار خوبی برای دستورزی‌های ژنتیکی است. باززایی سریع و موثر، اولین و مهم ترین نیاز پس از تراریخت سازی ریز نمونه هاست. <div style="direction: rtl"><b>مواد و روش‌ها:</b> پس از بررسی محیط‌های کشت یک و دو مرحله‌ای مختلف و محاسبه‌ی درصد باززایی نوساقه از ریز نمونه‌های میان گرهی ارقام دزیره، اگریا و مارفونای گیاه سیب زمینی، بهترین محیط‌های کشت یک و دو مرحله‌ای برای هر یک از این ارقام معرفی و ژن پروانسولین انسانی به روش انتقال به وسیله‌ی Agrobacterium tumefaciens به ژنوم هسته‌ای این گیاه منتقل شد. </div><div style="direction: rtl"><b>یافته‌ها :</b>میزان هورمون‌های زآتین ریبوزاید، نفتالن استیک اسید و جیبرلیک اسید مورد نیاز برای حصول حداکثر باززایی در محیط های مرحله‌ی اول کشت دو مرحله ای در ارقام دزیره، اگریا و مارفونا به ترتیب (3، 1/0، 02/0)، (3، 1/0، 02/0) و (5/3، 1/0، 02/0) و در محیط های کشت یک مرحله ای به ترتیب (4، 02/0، 05/0)، (3، 02/0، 05/0) و (4، 02/0، 05/0) میلی گرم در لیتر به دست آمد. در محیط‌های کشت مرحله دوم دو مرحله ای نیز میزان هورمون زآتین ریبوزاید و نفتالن استیک اسید به ترتیب به بیست در صد کمتر و یک دهم مقدار مورد استفاده در محیط‌های کشت مرحله‌ی اول کاهش یافت. بررسی گیاهان تراریخت در سه سطح DNA)، RNA و پروتئین( انجام شد. </div><div style="direction: rtl"><b>نتیجه‌گیری:</b> بهینه سازی ارگانوژنز نابجا در گیاه سیب زمینی (ارقام دزیره، اگریا و مارفونا) می‌تواند در زمینه‌های مختلف از جمله انتقال ژن‌های گوناگون به این ارقام مورد استفاده‌ی سایر محققین قرار گیرد. </div> <b> Aim and Background:</b>Plant based systems offer the potential for safe, economical and high-capacity production for many biopharmaceuticals. Potato (Solanum tuberosum L.) is a proper bioreactor and a very good candidate for genetic manipulation. After gene transformation to the explants, shoot regeneration is the first and the most remarkable necessity. <div><b>Materials and Methods:</b> After investigation of various one and two-step culture media for shoot regeneration of Desiree, Agria and Marfona internodal explants and calculation of shoot regeneration percentage, the best one and two-step shoot regeneration media is introduced for adventitious organogenesis in each of these varieties. Human proinsulin gene is transferred into nuclear genome of potato plant via Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation method. </div><div><b>Results:</b> The appropriate amounts of Zeatin Riboside, Naphthalene Acetic Acid and Gibberellic Acid hormones needed for maximum regeneration in two-step culture media for shoot regeneration of Desiree, Agria and Marfona internodal explants in the first stage were (3, 0.1, 0.02), (3, 0.1, 0.02) and (3.5, 0.1, 0.02) mg L-1 respectively. These amounts in one- step culture media were (4, 0.02, 0.05), (3, 0.02, 0.05) and (4, 0.02, 0.05) mg L-1 in that order. In the second stage of two- step culture media, zeatin riboside and naphthalene acetic acid levels were reduced by 20% and the factor of 10 respectively. Assessment of transgenic plants was carried out in 3 levels (DNA, RNA and protein). </div><div><b>Conclusion:</b> The optimization of adventitious organogenesis in Desiree, Agria and Marfona cultivars will be helpful for other researchers who want to study the transformation of these cultivars in future. </div> کشاورزی مولکولی,Agrobacterium tumefaciens , سیب زمینی تراریخته, پروانسولین انسانی و دیابت Molecular Farming, Agrobacterium tumefaciens, Transgenic Potato, Human Proinsulin and Diabetes 115 127 http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-419-2&slc_lang=fa&sid=1 Kimia Kashani کیمیا کاشانی 10031947532846003293 10031947532846003293 No Department of Plant Breeding and Biotechnology, Faculty of Agriculture, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشکده کشاورزی دانشگاه تربیت مدرس Mokhtar Jalali Javaran مختار جلالی جواران m_Jalali@modares.ac.ir 10031947532846003294 10031947532846003294 Yes Department of Plant Breeding and Biotechnology, Faculty of Agriculture, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشکده کشاورزی دانشگاه تربیت مدرس Ahmad Moieni احمد معینی 10031947532846003295 10031947532846003295 No Department of Plant Breeding and Biotechnology, Faculty of Agriculture, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشکده کشاورزی دانشگاه تربیت مدرس Mehdi Mohebodini مهدی محب الدینی 10031947532846003296 10031947532846003296 No Department of Horticulture Science, Faculty of Agriculture, University of Mohaghegh Ardabili, Iran دانشکده کشاورزی دانشگاه محقق اردبیلی