New Cellularand Molecular Biotechnology Journal
مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي
NCMBJ
Basic Sciences
http://ncmbjpiau.ir
1
admin
2228-5458
2228-6926
-
-
-
8888
-
fa
jalali
1393
12
1
gregorian
2015
3
1
5
17
online
1
fulltext
fa
ارزیابی اتصال گونه های کاندیدا آلبیکنس مقاوم به فلوکونازول در مقایسه با گونه کاندیدا گلابراتا بر روی دو ردهی سلولی واژن و روده
Evaluating the Adherence of Fluconazole Resistant Candida albicans Species in comparison with Candida glabrata Species on Vagina and Intestine Cell Lines
میکروبیولوژی
Microbiology
مقاله پژوهشی
Research Article
<b>سابقه و هدف:</b> ولوواژینیت کاندیدیایی یکی از شایعترین عفونت های دستگاه تناسلی زنان است که بر اثر رشد بیش از حد گونه های کاندیدا به ویژه کاندیدا آلبیکنس ایجاد شده و به صورت مزمن و عود کننده در می آید. کاندیدا گلابراتا نیزدومین یا سومین عامل کاندیدیازیس بعد از کاندیدا آلبیکنس می باشد. پس از استفاده گسترده و افزایش درمان های سرکوب کننده سیستم ایمنی همراه با درمان ضدقارچی، فراوانی عفونت های مخاطی و سیستماتیک ناشی از کاندیدا گلابراتا به طور قابل ملاحظه ای افزایش یافته است. فلوکونازول یکی از داروهای متداول جهت درمان بوده، ولی مقاومت هایی نیز در ارتباط با آن دیده شده است. اولین گام در ایجاد عفونت اتصال به سلو ل های اپیتلیالی می باشد. این پژوهش به منظور بررسی اتصال کاندیدا آلبیکنس و کاندیدا گلابراتای حساس و مقاوم به فلوکونازول بر سطوح رده های سلولی و روده صورت گرفت.
<br><b>مواد و روش ها:</b> در این مطالعه 160 سواب واژینال از بیماران مشکوک به کاندیدیازیس تهیه و سپس نمونه ها در محیط سابورو دکستروز آگار و پس از آن در محیط افتراقی کروم آگار کشت داده شدند. برای شناسایی قطعی گونه های کاندیدای مورد نظر، روش مولکولی RFLP-PCR اجرا گردید و کاندیدا آلبیکنس و کاندیدا گلابراتا برای مطالعه انتخاب شدند. در ادامه رده های سلولی Hella و HT29 در محیط DMEM غنی شده یا FBS کشت داده شدند. سپس 106 سلول مخمری شمارش و با هرکدام از رده های سلولی در پلیت 96 خانه ای کشت داده شده و پس از انکوباسیون، تعداد سلول های اتصال یافته و اتصال نیافته با کشت بر روی محیط سابورودکستروزآگار و شمارش تعداد کلنی به دست آمد.
<br><b>یافته ها:</b> نتایج به دست آمده نشان داد که نمونه های بالینی مقاوم به فلوکونازول بوده و قدرت و تمایل اتصال سلول های کاندیدا گلابراتابه سلول های اپیتلیال واژن نسبت به کاندیدا آلبیکس بیشتر است اما درمقابل قدرت و تمایل اتصال سلول های کاندیدا آلبیکس به سلول های اپیتلیال روده نسبت به سلول های کاندیدا گلابراتا بیشتر می باشد .
<br><b>نتیجه گیری:</b> تحقیقات انجام شده نشان داد که کاندیدا گلابراتا تمایل بیشتری برای اتصال به سلول های واژن دارد. با توجه به اینکه اطلاعات اندکی راجع به واکنش بین کاندیدا گلابراتا و سیستم ایمنی ذاتی وجود دارد، لذا توجه به شناخت این واکنش ها و عوامل مؤثر در اتصال گونه های کاندیدا به سطوح اپیتلیالی میزبان در شناخت پاتوژنز بیماری و ارایه روش های درمانی مناسب تر از اهمیت ویژه ای برخوردار می باشد.
<b>Aim and Background:</b> Vulvovaginal candidiasis is one of the most common female genital tract infections that is caused by overgrowth Candida species, especially Candida albicans and sometimes becomes chronic and recurrent form. Candida glabrata is the second or third leading cause of candidiasis after C. albicans. Following the widespread and increased use of immunosuppressive therapy along with broad-spectrum antimycotic therapy, the frequency of mucosal and systemic infections caused by C. glabrata has increased significantly. Fluconazole is one of the most common drugs used for treatment of this type of candidiasis but resistant is also seen. The first step in infection is adherence to epithelial cells. This study was designed to evaluate the adherence of fluconasole sensitive or resistant Candida albicans and Candida glabrata to Vagina and Intestine cell lines.
<br><b>Material and Methods:</b> In this study, 160 vaginal swabs were collected from women with vaginal candidiasis. Then samples were cultured on Sabaouraud Dextros Agar and Chromagar for morphologic analysis. For final identification of Candida species the PCR-RFLP was done and C. albicans and C. glabrata were selected for our study. Hella and HT29 cell line cultured in DMEM medium supplemented with FBS. The yeast cells were adjusted to 1×106 cell and then cultured with definite number of each cell line separately in 96- well micro plate and incubated in 37°C for 24 hours. After this period, the number of adherent and non-adherent cells was counted by culture on Sabaouraud Dextros Agar and colony count assay.
<br><b>Result:</b> According to our result, the clinical isolates are resistant to fluconazole and C. glabrata isolates had more ability to adhere to vaginal epithelial cells compared with C. albicans but, in contrast, C. albicans had more ability to adhere to intestinal epithelial cells rather than C. glabrata.
<br><b>Conclusion:</b> This research showed that C. glabrata had more ability to adhere to vaginal cells. As regards, there is little information about the reaction between C. glabrata and innate immune system, Therefore, recognition of the reactions and factors that mediate adherence to host epithelial surfaces has a particular importance for finding new aspects in the pathogenesis and a more suitable treatment for the disease.
ولوواژینیت کاندیدیایی؛RFLP-PCR؛ گونه های کاندیدا؛لاین سلولی
Vulvovaginal candidiasis, RFLP-PCR, vaginal and intestinal cell lines
74
80
http://ncmbjpiau.ir/browse.php?a_code=A-10-717-1&slc_lang=fa&sid=1
Zahra
Hasanpour Zaferani
زهرا
حسن پور زعفرانی
zahra_hasanpour63@yahoo.com
0082529167
10031947532846004009
No
Islamic Azad University ,Science and Research Branch ,Tehran, Iran
دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
Mansour
Bayat
منصور
بیات
dr_mansour_bayat@yahoo.com
10031947532846004010
10031947532846004010
Yes
Islamic Azad University ,Science and Research Branch ,Tehran, Iran
دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
Shahla
Roudbar Mohammadi
شهلا
رودبار محمدی
shahla_roudbarmohammadi@yahoo.com
10031947532846004011
10031947532846004011
No
, Tarbiat Modares University
دانشگاه تربیت مدرس