دوره 11، شماره 44 - ( 6-1400 )
جلد 11 شماره 44 صفحات 106-95 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Abbasifarid E, Bolhassani A, Irani S, Sotoodehnejadnematalahi F. Design of Eukaryotic Vector Harboring L1-E7 Polyepitope Fusion Construct of High Risk Human Papillomaviruses. NCMBJ 2021; 11 (44) :95-106
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1414-fa.html
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1414-fa.html
عباسی‌فرید الناز، بوالحسنی اعظم، ایرانی شیوا، ستوده‌نژاد نعمت‌الهی فتاح. طراحی و تهیه وکتور یوکاریوتی حامل ساختار فیوژن پلی اپی توپی L1-E7 ویروسهای پاپیلومای انسانی پر خطر. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1400; 11 (44) :95-106
گروه زیست‌شناسی، واحد علوم و تحقیقات تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
چکیده: (2430 مشاهده)
چکیده
سابقه و هدف: آلودگی به HPV بهعنوان اصلی‌ترین دلیل سرطان دهانه رحم شناخته می‌شود. این سرطان در دنیا، چهارمین سرطان شایع در میان زنان است. طراحی DNA واکسنی که علاوهبر پیشگیری، ویژگی‌های درمانی نیز داشته باشد می‌تواند در کاهش ابتلا و مرگ و میر تأثیر چشمگیری داشته باشد.
مواد و روش‌ها: توالی ژنی شامل اپیتوپهای ایمونوژنیک و حفاظت شده پروتئین‌های L1 و E7 ویروسهای پاپیلومای انسانی پر خطر طراحی گردید. پس از سنتز ساختار فیوژن L1-E7 در وکتور کلونینگ pUC57، ساب کلون کردن آن در وکتور یوکاریوتی pcDNA3.1(-) انجام شد. غلظت و خلوص پلاسمید نوترکیب pcDNA-L1E7 توسط اسپکتروفتومتری نانودراپ تعیین شد.
یافته‌ها: توالی ژنی موردنظر پس از برش از pUC57-L1E7 توسط آنزیمهای محدود الاثر BamHI/HindIII، در جایگاه مشابه وکتور pcDNA3.1(-) ساب کلون شد. تأیید حضور ژن در وکتور توسط هضم آنزیمی با BamHI/HindIII، قطعه 639 جفت بازی مربوط به ژن را روی ژل آگارز 1 درصد نشان داد. پلاسمید نوترکیب pcDNA-L1E7 توسط کیت استخراج فاقد اندوتوکسین بهمنظور جداسازی لیپوپلیساکارید باکتری تخلیص شد. غلظت DNA تخلیص شده، حدود 1474 نانوگرم/ میکرولیتر بهدست آمد.
نتیجه‌گیری: کلونینگ ساختار فیوژن L1-E7 در وکتور یوکاریوتی با موفقیت انجام گرفت. در مراحل بعدی از وکتور نوترکیب برای تحقیقات درون تنی واکسن ژنی استفاده خواهد شد.
سابقه و هدف: آلودگی به HPV بهعنوان اصلی‌ترین دلیل سرطان دهانه رحم شناخته می‌شود. این سرطان در دنیا، چهارمین سرطان شایع در میان زنان است. طراحی DNA واکسنی که علاوهبر پیشگیری، ویژگی‌های درمانی نیز داشته باشد می‌تواند در کاهش ابتلا و مرگ و میر تأثیر چشمگیری داشته باشد.
مواد و روش‌ها: توالی ژنی شامل اپیتوپهای ایمونوژنیک و حفاظت شده پروتئین‌های L1 و E7 ویروسهای پاپیلومای انسانی پر خطر طراحی گردید. پس از سنتز ساختار فیوژن L1-E7 در وکتور کلونینگ pUC57، ساب کلون کردن آن در وکتور یوکاریوتی pcDNA3.1(-) انجام شد. غلظت و خلوص پلاسمید نوترکیب pcDNA-L1E7 توسط اسپکتروفتومتری نانودراپ تعیین شد.
یافته‌ها: توالی ژنی موردنظر پس از برش از pUC57-L1E7 توسط آنزیمهای محدود الاثر BamHI/HindIII، در جایگاه مشابه وکتور pcDNA3.1(-) ساب کلون شد. تأیید حضور ژن در وکتور توسط هضم آنزیمی با BamHI/HindIII، قطعه 639 جفت بازی مربوط به ژن را روی ژل آگارز 1 درصد نشان داد. پلاسمید نوترکیب pcDNA-L1E7 توسط کیت استخراج فاقد اندوتوکسین بهمنظور جداسازی لیپوپلیساکارید باکتری تخلیص شد. غلظت DNA تخلیص شده، حدود 1474 نانوگرم/ میکرولیتر بهدست آمد.
نتیجه‌گیری: کلونینگ ساختار فیوژن L1-E7 در وکتور یوکاریوتی با موفقیت انجام گرفت. در مراحل بعدی از وکتور نوترکیب برای تحقیقات درون تنی واکسن ژنی استفاده خواهد شد.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
سلولی و مولکولی
دریافت: 1400/1/25 | پذیرش: 1400/5/1 | انتشار: 1400/6/10
دریافت: 1400/1/25 | پذیرش: 1400/5/1 | انتشار: 1400/6/10
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
