دوره 16، شماره 62 - ( 3-1405 )                   جلد 16 شماره 62 صفحات 73-63 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Ezzatizadeh F, Bolhassani A, Sotoodehnejadnematalahi F, Fateh A. Construction of an Expression Vector Carrying the Human Papillomavirus Type 16 Oncogene E5 and Evaluation of Its Expression in an E. coli Expression System. NCMBJ 2026; 16 (62) :63-73
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1822-fa.html
عزتی زاده فهیمه، بوالحسنی اعظم، ستوده نژاد نعمت اللهی فتاح، فاتح ابوالفضل. ساخت وکتور بیانیِ حاملِ انکوژن E5 ویروس پاپیلومای انسانی و بررسی بیان آن در سیستم بیانیِ E. coli. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1405; 16 (62) :63-73

URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1822-fa.html


بخش هپاتیت، ایدز و ویروس‌های منتقله از خون، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
چکیده:   (13 مشاهده)

زمینه و هدف: نقشِ کلیدیِ انکوپروتئینهای ویروسِ پاپیلومای انسانیِ نوعِ 16 (HPV16) در شدتِ بیماری و حتی تشخیصِ زودهنگامِ سرطان‌های مرتبط با HPV16 بررسی شده است. هدف و تمرکزِ مطالعۀ حاضر روی کلونینگ و بیان یکی از انکوژن‌های ویروس تحتِ عنوانِ E5 در سیستم E. coli به‌منظور تخلیص و تعیینِ عملکردِ آن در آینده می‌باشد.
مواد و روش‌ها: در این پژوهش، کلون کردن ژنِ E5 ویروسِ پاپیلومای انسانی نوعِ 16 در وکتورِ بیانِ پروکاریوتی pET28a (plasmid expression T7) انجام شد. سپس، بیانِ پروتئینِ نوترکیبِ E5 در سیستمِ بیانیِ E. coli با استفاده از روش‌های SDS-PAGE و وسترن بلات موردبررسی قرار گرفت.
نتایج: نتایج ما نشان دادند که ژنِ E5 کلون‌شده در وکتورِ بیانیِ pET28a (+) با اندازۀ 240 جفت‌باز، قادر به بیان در سیستمِ اشرشیاکلی سویۀ BL21 تحتِ شرایطِ دمای 37 درجۀ سانتی‌گراد، غلظتِ 5/0 میلی‌مولار IPTG و 18 ساعت پس از القاست. آنالیزِ SDS-PAGE و وسترن بلات حضور باندِ 10 کیلودالتونیِ مربوط به بیانِ پروتئینِ نوترکیبِ E5 را تأیید کردند.

نتیجه‌گیری: با توجه به بیانِ پروتئینِ E5 غنی از اسیدآمینه‌های آب‌گریز در سیستمِ بیانیِ باکتری و عدم‌نیاز به مدیفیکاسیون در این پروتئین نظیرِ فسفریلاسیون و گلیکوزیلاسیون، تخلیصِ پروتئینِ نوترکیب به‌منظورِ ارزیابیِ عملکردِ آن در طراحیِ واکسن در آینده صورت خواهد گرفت.

متن کامل [PDF 818 kb]   (3 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی | موضوع مقاله: سلولی و مولکولی
دریافت: 1405/3/31 | پذیرش: 1405/3/10 | انتشار: 1405/3/10

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA

بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2026 CC BY-NC 4.0 | New Cellular and Molecular Biotechnology Journal

Designed & Developed by : Yektaweb