چکیده: (4254 مشاهده)
سابقه و هدف: سالمونلوز یکی از بیماریهای مهم مشترک بین انسان و حیوان است که پراکندگی جغرافیایی بسیار وسیعی دارد. از مهمترین منابع آلودگی سالمونلا در انسان سبزیها، فرآوردههای لبنی، محصولهای دریایی، مواد گوشتی بهویژه گوشت ماکیان، تخممرغ و فرآوردههای جانبی آنها است. روشهای استاندارد مبتنی بر کشت باکتری برای تشخیص گونههای سالمونلا حساس ولی زمانبر است. PCR از حساسیت و دقت بالایی برای شناسایی عوامل عفونی برخوردار است. ژن hilA از ژنهای رمز کننده پروتئینهای تنظیم کننده نسخهبرداری و از ژنهای با حفاظت ژنتیکی بالا است که میتوان از آن در جهت شناسایی سالمونلا بهره برد. هدف از این تحقیق، شناسایی باکتری سالمونلا در مدفوع شترمرغ بر پایه وجود ژن hilA به کمک روش PCR و بررسی اختصاصیت این روش در مقایسه با روشهای متداول است.
مواد و روشها: 500 نمونه از مدفوع شترمرغهای منطقه سیرجان که پیشتر برای تشخیص سویههای سالمونلایی مورد بررسی کشتهای افتراقی و تستهای بیوشیمیایی قرار گرفته بود برای آزمون حضور ژن hilA استفاده شد. DNA باکتریها از نمونههای مدفوع شترمرغها بعد از حل کردن مدفوع در محیط کشت و 24 ساعت نگهداری در دمای 37 درجه سلسیوس، استخراج گردید و به کمک PCR و استفاده از پرایمرهای اختصاصی جهت بررسی حضور ژن hilA مورد ارزیابی قرار گرفتند.
یافته ها: بررسی وجود ژن hilA از میان 500 نمونه مدفوع نشان داد که در 38 نمونه مدفوع، باکتری سالمونلا حضور دارد که با نتایج آزمون استاندارد برای شناسایی سالمونلا مطابقت داشت. قابل ذکر است که نتایج حاصل از بررسی ژن hilA در همان نمونههایی مثبت بود که حضور باکتری سالمونلا قبلا توسط آزمونهای استاندارد تأیید گردیده بود.
نتیجه گیری: نتایج به دست آمده نشان میدهد که بررسی ژن hilA با استفاده از PCR و پرایمرهای اختصاصی میتواند روشی جایگزین با سرعت و دقت بالا و هزینه بهنسبت پایین برای تشخیص باکتری سالمونلا در میان نمونههای مدفوع پرندگان باشد. با توجه به اینکه شیوع عفونتهای سالمونلایی در میان پردنگان و ماکیان بهنسبت بالا است شناسایی این عفونتها با سرعت و دقت بالا اهمیتی ویژهای دارد. این مطالعه نشان داد که بررسی ژن hilA با استفاده از روش PCR میتواند در این زمینه مؤثر باشد.
نوع مطالعه:
مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
سلولی و مولکولی دریافت: 1397/9/26 | پذیرش: 1397/9/26 | انتشار: 1397/9/26