حیدری فریبا، دوستی عباس. بررسی میزان بیان ژنGPR83 سلولهای AGS ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-3-tagD. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1399; 10 (39) :39-48
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1298-fa.html
گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
چکیده: (2562 مشاهده)
سابقه و هدف:
عفونت هلیکوباکترپیلوری از عوامل اصلی ایجادکننده سرطان معده در انسان است. ژن tagD هلیکوباکترپیلوری که کد کننده آنزیم تیول پروکسیداز است، نقش مهمی در کلونیزهشدن باکتری در جدار معده انسان ایفا میکند. تحقیقات نشان داده است که ژن GPR83 در سرطان معده افزایش بیان دارند و هدف از این تحقیق بررسی میزان بیان ژن GPR83، در ﺳﻠﻮلهای ﺳﺮﻃﺎﻧﻲ آدﻧﻮﻛﺎرﺳﻴﻨﻮﻣﺎی ﻣﻌﺪه (adenocarcinoma gastric cell line[S1] یا (AGS[M2] ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-3-tagD بهروش Real Time PCR[M3] است.
مواد و روشها: سلولهای AGS به کمک محلول لیپوفکتامین و با پلاسمید حامل ژن کد کننده tagD هلیکوباکتر پیلوری یا پلاسمید خالی (کنترل)، ترانسفکت شدند. سپس استخراج RNA از سلولهای کشت داده شده انجام شد و سنتز cDNA صورت پذیرفت و سپس بیان یوکاریوتی ژن tagD[M4] هلیکوباکترپیلوری در سلولهای AGS با روش RT-PCR بررسی شد. میزان بیان ژنهای GPR83، با روش Real Time PCR ارزیابی گردید. لازمبه ذکر است که برای بررسی آپوپتوز از کیت انکسین استفاده شد و در نهایت با استفاده از نرمافزار SPSSو آزمونهای آماری t-test Indepent بیان هر یک از ژنها بررسی شد.
یافته ها: یافتههای به دست آمده از آنالیز بیان ژن نشان داد که بیان ژن GPR83 در سلولهای AGS تیمار شده با tagD نسبتبه سلولهای کنترل افزایش بیان داشت اما این افزایش بیان از لحاظ آماری معنیدار نبود (P= 0.0888).
نتیجه گیری: به طور کلی، دادههای به دست آمده از این تحقیق حاکی از آن بود که بیان ژن GPR83 در سلولهای تحت تیمار با ژن tagD هلیکوباکترپیلوری[M5] ، تغییر مییابد و بهنظر میرسد که ژن GPR83 هلیکوباکترپیلوری در ایجاد این تغییر بیان نقش دارد.
نوع مطالعه:
مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
سلولی و مولکولی دریافت: 1399/5/12 | پذیرش: 1399/1/10 | انتشار: 1399/1/10