دوره 11، شماره 43 - ( 4-1400 )
جلد 11 شماره 43 صفحات 45-39 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Mohammadi N, Bandehpour M, Sotoodehnejadnematalahi F, Kazemi B. Recombinant Production of metalloproteinase domain of Ecarin as the main activator of prothrombin. NCMBJ 2021; 11 (43) :39-45
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1393-fa.html
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1393-fa.html
محمدی نسرین، بنده‌پور مژگان، ستوده‌نژاد نعمت‌اللهی فتاح، کاظمی بهرام. تولید دمین نوترکیب متالوپروتئیناز ایکارین به عنوان فعال کننده اصلی پروترومبین در سلول HEK293. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1400; 11 (43) :39-45
گروه زیست‌شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
چکیده: (2278 مشاهده)
سابقه و هدف: امروزه بیماران زیادی به دلیل نقص یا عدم عملکرد فاکتورهای انعقادی و استفاده از انواع داروهای رقیق‌کننده خون درگیر اختلالات انعقادی بوده و نیازمند بررسی کل پروترومبین و تعیین مقدار بازدارنده‌های مستقیم ترومبین می‌باشند. با وجود مطالعه روی ایکارین سم مار جعفری، به عنوان یک فعال‌کننده مستقیم پروترومبین، هنوز در مورد مکان فعال این آنزیم تحقیق و بررسی انجام نشده است.
مواد و روش‌ها: دمین متالوپروتئیناز ایکارین با طول 639 جفت باز در وکتور pcDNA3.1 سنتز گردید و پلاسمید یوکاریوتی نوترکیب به رده سلولی HEK293 انتقال یافت. با استفاده از روش SDS-PAGE بیان پروتئین مورد ارزیابی قرار گرفت و عملکرد آن در واکنش با پروترومبین و با استفاده ازتست زمان پروترومبین سنجیده شد.
یافته‌ها: نتایج نشان داد که دمین متالوپروتئیناز ایکارین تولید شده در سیستم بیانی HEK293 ، مانند ایکارین کامل، قادر به تولید ترومبین از پروترومبین است. اما در مقایسه با پروتئین مشابه تولید شده در سیستم پروکاریوتی، شروع فعالیت آن آهسته بود.
نتیجه‌گیری: دراین بررسی دمین متالوپروتئینازی ایکارین که به صورت نوترکیب در سلولهای HEK293 تولید گردید، همانند ایکارین کامل قادر به فعال کردن پروترومبین به ترومبین بود و برای اولین‌بار به عنوان یک جایگزین مناسب برای هر دو نوع ایکارین طبیعی و نوترکیب در روش‌های مبتنی بر تبدیل پروترومبین به ترومبین معرفی شد.
مواد و روش‌ها: دمین متالوپروتئیناز ایکارین با طول 639 جفت باز در وکتور pcDNA3.1 سنتز گردید و پلاسمید یوکاریوتی نوترکیب به رده سلولی HEK293 انتقال یافت. با استفاده از روش SDS-PAGE بیان پروتئین مورد ارزیابی قرار گرفت و عملکرد آن در واکنش با پروترومبین و با استفاده ازتست زمان پروترومبین سنجیده شد.
یافته‌ها: نتایج نشان داد که دمین متالوپروتئیناز ایکارین تولید شده در سیستم بیانی HEK293 ، مانند ایکارین کامل، قادر به تولید ترومبین از پروترومبین است. اما در مقایسه با پروتئین مشابه تولید شده در سیستم پروکاریوتی، شروع فعالیت آن آهسته بود.
نتیجه‌گیری: دراین بررسی دمین متالوپروتئینازی ایکارین که به صورت نوترکیب در سلولهای HEK293 تولید گردید، همانند ایکارین کامل قادر به فعال کردن پروترومبین به ترومبین بود و برای اولین‌بار به عنوان یک جایگزین مناسب برای هر دو نوع ایکارین طبیعی و نوترکیب در روش‌های مبتنی بر تبدیل پروترومبین به ترومبین معرفی شد.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
سلولی و مولکولی
دریافت: 1399/11/25 | پذیرش: 1400/3/30 | انتشار: 1400/4/10
دریافت: 1399/11/25 | پذیرش: 1400/3/30 | انتشار: 1400/4/10
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
