دوره 12، شماره 45 - ( 8-1400 )
جلد 12 شماره 45 صفحات 127-113 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Ebrahimifard M, Forghanifard M M, Yamchi A, Zarrinpur V. Optimization of light chain production of human enterokinase enzyme for use in the pharmaceutical industry. NCMBJ 2021; 12 (45) :113-127
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1440-fa.html
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1440-fa.html
ابراهیمی فرد محمد، فرقانی فرد محمد مهدی، یامچی احد، زرین پور وجیهه. بهینه سازی تولید زنجیره سبک آنزیم انتروکیناز انسانی به منظور استفاده در صنایع دارویی. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1400; 12 (45) :113-127
گروه بیوتکنولوژی، دانشگاه علوم کشاوزی و منابع طبیعی گرگان، گرگان، ایران.
چکیده: (2617 مشاهده)
سابقه و هدف: انتروکیناز یک آنزیم دستگاه گوارش است که به عنوان یک پروتئاز با توالی خاص عمل می کند. به دلیل توانایی انتروکیناز برای هضم آنزیمی پروتئین نوترکیب در سایت اختصاصی آن (شامل چهار اسید آمینه آسپارتیک اسد و یک اسید آمینه لیزین می باشد) که در پروتئین هدف قرار داده می شود، به عنوان یک ابزار بسیار مفید برای امکان خالص سازی و جداسازی بخش پروتئین هدف از بخش غیر هدف در صنایع دارویی، غذایی و صنعتی مورد استفاده قرار می گیرد.
مواد و روشها: متغیرهای مستقل مورد استفاده شامل میزان OD (6/0، 2/1 و 8/1) در طول موج 600 نانومتر، غلظت IPTG (2/0، 5/0 و 8/0 میلی مولار) و نوع سویه باکتری (ShuffleT7, BL21, NICO21) بود. از روش سطح پاسخ (RSM) در قالب طرح مرکب مرکزی برای پیش بینی متغیرهای مستقل بر میزان تولید آنزیم انتروکیناز استفاده شد.
یافته ها: میزان OD برابر با 8/1 در طول موج 600 نانومتر، غلظت IPTG 71/0 میلی مولار و نوع سویه باکتری ShuffleT7، محیط کشت LB، غلظت لاکتوز 5/2 میلی مولار و دمای القاء 25 درجه سانتیگراد، برای تولید آنزیم انتروکیناز نوترکیب بهینه سازی شد.
بحث و نتیجه گیری: پروتئینهای دارویی نقش مهمی در درمانهای نوین پزشکی مولکولی دارند. بیان ژن انتروکیناز در سیستم باکتریایی، تسهیل در خالص سازی غلظت هایی که پایین است را فراهم می کند، بنابراین پروتئین های نوترکیب در مقیاس وسیع و با خلوص زیاد می توانند در سیستم باکتریایی تولید و بهینه سازی شوند.
مواد و روشها: متغیرهای مستقل مورد استفاده شامل میزان OD (6/0، 2/1 و 8/1) در طول موج 600 نانومتر، غلظت IPTG (2/0، 5/0 و 8/0 میلی مولار) و نوع سویه باکتری (ShuffleT7, BL21, NICO21) بود. از روش سطح پاسخ (RSM) در قالب طرح مرکب مرکزی برای پیش بینی متغیرهای مستقل بر میزان تولید آنزیم انتروکیناز استفاده شد.
یافته ها: میزان OD برابر با 8/1 در طول موج 600 نانومتر، غلظت IPTG 71/0 میلی مولار و نوع سویه باکتری ShuffleT7، محیط کشت LB، غلظت لاکتوز 5/2 میلی مولار و دمای القاء 25 درجه سانتیگراد، برای تولید آنزیم انتروکیناز نوترکیب بهینه سازی شد.
بحث و نتیجه گیری: پروتئینهای دارویی نقش مهمی در درمانهای نوین پزشکی مولکولی دارند. بیان ژن انتروکیناز در سیستم باکتریایی، تسهیل در خالص سازی غلظت هایی که پایین است را فراهم می کند، بنابراین پروتئین های نوترکیب در مقیاس وسیع و با خلوص زیاد می توانند در سیستم باکتریایی تولید و بهینه سازی شوند.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
ژنتیک
دریافت: 1400/6/6 | پذیرش: 1400/8/6 | انتشار: 1400/10/1
دریافت: 1400/6/6 | پذیرش: 1400/8/6 | انتشار: 1400/10/1
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
