دوره 12، شماره 46 - ( 1-1401 )                   جلد 12 شماره 46 صفحات 34-25 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Phalsaphi S, Amani J, Mirhosseini S A. Cloning, Expression and Purification of the Outer Membrane of Tir Protein from E.coli O157: H7 and Evaluation its Structure. NCMBJ. 2022; 12 (46) :25-34
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1453-fa.html
فلسفی شیلا، امانی جعفر، میرحسینی سیدعلی. همسانه سازی، بیان و تخلیص بخش خارج غشایی پروتئین Tir از باکتری E.coli O157:H7 و ارزیابی ساختاری آن. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1401; 12 (46) :34-25

URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1453-fa.html


انستیتو سیستم بیولوژی و مسمومیت ها، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران ، ali.mirh@gmail.com
چکیده:   (872 مشاهده)
سابقه و هدف باکتری اشرشیاکلی انتروهموراژیک (Enterohemorrhagic Ecoli) سویه­ی O157:H7 یک پاتوژن مهم انسان و حیوان است که در انسان موجب بروز اسهال خونریزی دهنده و سندروم اورمی همولیتیک می شود. اتصال به سلول­های میزبان اولین گام در تثبیت این باکتری است که به واسطه­ی سیستم ترشحی نوع  (T3SS) III و از طریق میان­کنش بین پروتئین­های ترشحی صورت می­گیرد. Tir پروتئینی است که پس از بیان در باکتری و از طریق  T3SS به سلول میزبان منتقل و در غشای آن مستقر می شود و نقش مهمی در اتصال باکتری به میزبان دارد. هدف از این تحقیق ساخت سازه ژنی است که دارای فاکتورهای ویرولانس Tir می­باشد.
مواد و روش­ ها: :  طراحی پرایمر اختصاصی برای ژن tir با استفاده از نرم افرازOligo  انجام شد و تکثیر ژن به وسیله واکنش    PCRاز روی DNA الگو صورت گرفت. پس از واکنش­های هضم آنزیمی و الحاق ژن درون ناقل بیانی pET28a  ، انتقال ناقل به درون میزبان بیانی انجام شد. پس از تایید همسان­سازی ژن، بیان نوترکیب پروتئین   Tirبا استفاده از القاگر IPTG  صورت گرفت. برای تایید پروتئین Tir  آنالیز وسترن بلات انجام شد.
 یافته‌ها: : همسان سازی ژن tir درون وکتور pET28a به شکل مناسب بین جایگاه­های مطلوب انجام شد و پروتئین Tir پس از القا، پروتئین نوترکیب بیان  مناسب و قابل توجهی نشان داد. آنتی بادی مورد استفاده در وسترن بلات نیز توانست به شکل مناسبی Tir را شناسایی کند.
نتیجه‌گیری: در این مطالعه، سازه پایدار محتوی ژن tir ساخته شد که بیان نوترکیب قابل توجهی از پروتئین Tir را از خود نشان داد. بنابراین این سازه را می توان برای تولید پروتئین Tir جهت مطالعات ایمنی زایی علیه E.coli O157:H7  به کاربرد..
 
متن کامل [PDF 456 kb]   (124 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی | موضوع مقاله: ژنتیک
دریافت: 1399/10/23 | پذیرش: 1400/9/16 | انتشار: 1401/1/22

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA

ارسال پیام به نویسنده مسئول


بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2022 CC BY-NC 4.0 | New Cellular and Molecular Biotechnology Journal

Designed & Developed by : Yektaweb