دوره 14، شماره 55 - ( 4-1403 )
جلد 14 شماره 55 صفحات 51-41 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Ahmadi D, Zargar M, Zolfaghari M R, Kazemimanesh M, Ghaemi A. Comparison of the transfection efficiency of cationic virosome derived from vesicular stomatitis virus and the two commercial transfection reagents in HEK-293 and Vero cell lines. NCMBJ 2024; 14 (55) :41-51
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1679-fa.html
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1679-fa.html
احمدی دلارام، زرگر محسن، ذوالفقاری محمدرضا، کاظمی منش منیره، قائمی امیر. مقایسه بازدهی ترانسفکشن وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس وزیکولار استوماتیتیس و دو معرف ترانسفکشن تجاری در رده‌های سلولی HEK-293 و Vero. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1403; 14 (55) :41-51
گروه میکروب شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد قم، دانشگاه آزاد اسلامی، قم، ایران ، zargar@qom-iau.ac.ir
چکیده: (202 مشاهده)
سابقه و هدف: تحویل موفقیت آمیز یک ژن به سلول هدف مستلزم ایجاد یک سیستم انتقال ژن ایمن تر و کارآمدتر است. این مطالعه با هدف ارزیابی کارایی ترانسفکشن وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس وزیکولار استوماتیتیس (VSV) به عنوان یک نانوحامل هیبریدی در مقایسه با دو معرف ترانسفکشن تجاری از جمله لیپوفکتامین 2000 و GenJet™ در دو رده سلولی HEK-293 و Vero انجام شد.
مواد و روش ها: بازدهی ترانسفکشن وایروزوم کاتیونیک VSV، لیپوفکتامین 2000 و GenJet™ در دو رده سلولی HEK-293 و Vero با استفاده از ترانسفکشن پلاسمید pEGFP-N1، میکروسکوپ فلورسنت و تکنیک فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین، میزان سمیت وایروزوم کاتیونیک و معرف های تجاری ترانسفکشن به وسیله آزمون MTT بررسی گردید. اثر مهاری NH4Cl بر روی بازده ترانسفکشن وایروزوم به وسیله میکروسکوپ فلورسنت و فلوسایتومتری آنالیز گردید.
یافته ها: یافتههای ما نشان داد که بالاترین سطح بیان EGFP در سلول های ترانسفکت شده با لیپوفکتامین 2000 بدست آمد. بازده ترانسفکشن در هر دو رده سلولی ترانسفکت شده با وایروزوم/ pEGFP-N1 در مقایسه با pEGFP-N1/GenJetTM افزایش معنی داری داشت) 0.01 > P , 0.05 >( P . به علاوه، نتایج آنالیز زنده مانی سلولی به وسیله MTT با نتایج بدست آمده از ارزیابی بازده ترانسفکشن تطابق داشت. سلول های ترانسفکت شده با لیپوفکتامین 2000 بالاترین میزان زنده مانی را از خود نشان دادند. زنده مانی سلولی در سلول های ترانسفکت شده با وایروزوم کاتیونیک VSV در مقایسه با سلول های ترانسفکت شده با GenJet™ به طور قابل توجهی بالاتر بود ( 0.05 >( P . نتایج نشان داد که در سلولهای HEK-293 تیمار شده با NH4Cl، ترانسفکشن مهار گردید.
نتیجه گیری: وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس VSV حاوی VSV-G یک نانوحامل هیبریدی کارآمد با تروپیسم سلولی وسیع است که بینشی جدید در مورد کاربرد به عنوان یک سیستم تحویل ژن در مطالعات ژن درمانی ارائه می دهد.
مواد و روش ها: بازدهی ترانسفکشن وایروزوم کاتیونیک VSV، لیپوفکتامین 2000 و GenJet™ در دو رده سلولی HEK-293 و Vero با استفاده از ترانسفکشن پلاسمید pEGFP-N1، میکروسکوپ فلورسنت و تکنیک فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین، میزان سمیت وایروزوم کاتیونیک و معرف های تجاری ترانسفکشن به وسیله آزمون MTT بررسی گردید. اثر مهاری NH4Cl بر روی بازده ترانسفکشن وایروزوم به وسیله میکروسکوپ فلورسنت و فلوسایتومتری آنالیز گردید.
یافته ها: یافتههای ما نشان داد که بالاترین سطح بیان EGFP در سلول های ترانسفکت شده با لیپوفکتامین 2000 بدست آمد. بازده ترانسفکشن در هر دو رده سلولی ترانسفکت شده با وایروزوم/ pEGFP-N1 در مقایسه با pEGFP-N1/GenJetTM افزایش معنی داری داشت) 0.01 > P , 0.05 >( P . به علاوه، نتایج آنالیز زنده مانی سلولی به وسیله MTT با نتایج بدست آمده از ارزیابی بازده ترانسفکشن تطابق داشت. سلول های ترانسفکت شده با لیپوفکتامین 2000 بالاترین میزان زنده مانی را از خود نشان دادند. زنده مانی سلولی در سلول های ترانسفکت شده با وایروزوم کاتیونیک VSV در مقایسه با سلول های ترانسفکت شده با GenJet™ به طور قابل توجهی بالاتر بود ( 0.05 >( P . نتایج نشان داد که در سلولهای HEK-293 تیمار شده با NH4Cl، ترانسفکشن مهار گردید.
نتیجه گیری: وایروزوم کاتیونیک مشتق شده از ویروس VSV حاوی VSV-G یک نانوحامل هیبریدی کارآمد با تروپیسم سلولی وسیع است که بینشی جدید در مورد کاربرد به عنوان یک سیستم تحویل ژن در مطالعات ژن درمانی ارائه می دهد.
واژه‌های کلیدی: وایروزوم، ترانسفکشن، نانوحامل، ویروس وزیکولار استوماتیتیس، ژن درمانی، لیپوفکتامین 2000، GenJet™، Iau Science.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
فیزیولوژی
دریافت: 1403/5/20 | پذیرش: 1403/4/10 | انتشار: 1403/4/10
دریافت: 1403/5/20 | پذیرش: 1403/4/10 | انتشار: 1403/4/10
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
