دوره 6، شماره 21 - ( 10-1394 )                   جلد 6 شماره 21 صفحات 34-29 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Sagha M, Aghvami Tehrani A, Golmohammadi M G. Whole-mount In situ Hybridization in chick embryo. NCMBJ 2016; 6 (21) :29-34
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-760-fa.html
سقا محسن، اقوامی تهرانی آزاده، گل محمدی محمد قاسم. دورگه سازی در محل بر روی جنین جوجه. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1394; 6 (21) :29-34

URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-760-fa.html


آزمایشگاه تحقیقاتی جنین شناسی و سلولهای بنیادی، گروه علوم تشریحی و پاتولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، اردبیل، ایران ، m.sagha@arums.ac.ir
چکیده:   (9126 مشاهده)

سابقه و هدف: تکنیک  دورگه سازی در محل بر روی جنین (wmISH) یکی از ابزار های قدرتمند در بررسی جایگاه بیان رونوشت ژن در بافت های جنینی است. این مطالعه با هدف راه اندازی این تکنیک با استفاده از کاوشگر ضد الگوی آنزیم RALDH2 که با دیگوکسی ژنین نشاندار شده بود انجام شد.

مواد و روش ها: پس از جداسازی جنین جوجه در مراحل ابتدایی تکوین، آنها فیکس و آبگیری شدند و پس از بیرنگ شدن و تاثیر پروتئین کیناز K بر آنها ابتدا محلول دورگه سازی و بعد محلول دورگه سازی حاوی کاوشگر ضد الگوی آنزیم RALDH2  به مدت 36 ساعت بر آنها تاثیر داده شد. در نهایت پس از شستشو با محلول SSC و انکوبه شدن با آنتی بادی ضد دیگوکسی ژنین  به آنها محلول NBT/BCIP افزوده شد و جنین ها به محیط بافری NTMT  منتقل شدند. به دسته از جنین ها کاوشگر الگوی این آنزیم اضافه شد و به جنین های کنترل منفی نیز هیچ گونه کاوشگری افزوده نشد.

یافته ها:  پس از گذشت 36 ساعت به دنبال اتصال کاوشگر ضد الگوی آنزیم RALDH2 به رونوشت های این آنزیم در سومایت های جنینی و نیز لوله های عصبی و قلبی جنین جایگاه حضور این رونوشت ها در بافت های مذکور به رنگ آبی مشاهده شدند. در گروه هایی که کاوش گر الگو اضافه شده بود و نیز گروه کنترل منفی سومایت ها و بافت عصبی رنگ نگرقته بودند.

نتیجه گیری: با استفاده از تکنیک  wmISH  می توان ارزیابی دقیقی از مکان و میزان بیان رونوشت ژن ها در جنین به دست آورد.

متن کامل [PDF 280 kb]   (1852 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی | موضوع مقاله: ژنتیک
دریافت: 1394/10/29 | پذیرش: 1394/10/29 | انتشار: 1394/10/29

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA

ارسال پیام به نویسنده مسئول


بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2024 CC BY-NC 4.0 | New Cellular and Molecular Biotechnology Journal

Designed & Developed by : Yektaweb