دوره 14، شماره 53 - ( 10-1402 )
جلد 14 شماره 53 صفحات 42-21 |
برگشت به فهرست نسخه ها
نجمه یارکه سلخوری 
، تقی ناصر پور فریور ، جمیله نوروزی ، رضا نجفی پور ، پرویز پاکزاد ، صفر علی علیزاده
، تقی ناصر پور فریور ، جمیله نوروزی ، رضا نجفی پور ، پرویز پاکزاد ، صفر علی علیزاده
مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی ، دانشکده علوم پایه ، دانشگاه علوم پزشکی قزوین ، قزوین ، ایران ، biopromeda@gmail.com
چکیده: (351 مشاهده)
سابقه و هدف: ویروس درمانی انکولیتیک به‌عنوان راهکاری نویدبخش برای درمان سرطان شناخته میشود. ویروسهای انکولیتیک مانند آدنوویروس‌ها قادرند در سلولهای سرطانی تکثیر و آنها را متلاشی کنند. آدنوویروس سروتیپ 5 ازطریق گیرنده کوکساکی- آدنوویروس به سطح سلولهای میزبان متصل میشود. میزان بیان این گیرنده در سطح سلولهای سرطانی بسیار متغییر است. هدف از این مطالعه، ساخت آدنوویروس انکولیتیک با ویژگی انتخابی بالا برای سلولهای آدنوکارسینومای معده(AGS) بوده که قادرند در این سلولها تکثیر و آنها را تخریب کنند.
مواد و روش ها: در مطالعه تجربی حاضر، توالی اکتروتات در ناحیهHI-loop فیبرآدنوویروس کلون گردید و بدین ترتیب وکتورهای نوترکیب pAd5TATE(wt)و pAd5TATE(ΔE1,ΔE3) ساخته شدند. وکتور pAdZ-TATE(wt) با استفاده از سیستم کلونینگ pADZ سنتز شد. ذرات ویروسی نوترکیب Ad5TATE(wt) و Ad5TATE(ΔE1,ΔE3) سنتز شد و در سلول های HEK293 تکثیر شد. با استفاده از روش کلسیم فسفات، وکتورهای نوترکیب به رده سلولیHEK293 منتقل و بدین ترتیب ذرات ویروسی جدید تولید شد. رده سلولی AGS با ویروس Ad5(wt) و Ad5TATE(wt) آلوده شدند و در زمانهای مختلف، بروز اثرات تخریب سلولی در این سلولها بررسی شد. با استفاده از آزمونMTT، میزان بقای سلولی در رده سلولی AGS تیمار شده با ویروس نوترکیب بررسی گردید.
یافته ها: اثرات تخریب سلولی(CPE) در کمتر از 18 ساعت شروع و 72 ساعت بعد از آلودگی کامل گردید. تیتر ویروسهای نوترکیب با روش TCID50 برابر107 (برای Lµ 100 از محلول ویروسی) محاسبه شد. همچنین تیتر ویروس Ad5TATE(ΔE1,ΔE3) با روش TCID50 برابر TCID50/ml 107 بود. نتایج نشانداد، Ad5TATE(wt) در مقایسه باAd5(wt) ، توانایی آلوده‌سازی سلولهای رده AGS را دارد. نتایج حاصل از آزمون MTT نشان داد، با افزایش غلظت ذرات ویروسی و زمان نگهداری، تعداد سلولهای زنده AGS به‌طور قابل‌ملاحظه‌ای کاهش یافت.
نتیجه گیری: یافتههای این پژوهش نشان داد، ویروس نوترکیبAd5TATE(wt) قادر است به صورت اختصاصی سلولهای سرطانی رده سلولی آدنوکارسینوما معده (AGS) را آلوده و پس از تکثیر، آن ها را متلاشی کند. لذا میتوان از ویروس Ad5TATE(wt) به‌عنوان عامل انکولیتیک علیه سلولهای سرطانی رده سلولی آدنوکارسینوما معده(AGS) استفاده کرد.
مواد و روش ها: در مطالعه تجربی حاضر، توالی اکتروتات در ناحیهHI-loop فیبرآدنوویروس کلون گردید و بدین ترتیب وکتورهای نوترکیب pAd5TATE(wt)و pAd5TATE(ΔE1,ΔE3) ساخته شدند. وکتور pAdZ-TATE(wt) با استفاده از سیستم کلونینگ pADZ سنتز شد. ذرات ویروسی نوترکیب Ad5TATE(wt) و Ad5TATE(ΔE1,ΔE3) سنتز شد و در سلول های HEK293 تکثیر شد. با استفاده از روش کلسیم فسفات، وکتورهای نوترکیب به رده سلولیHEK293 منتقل و بدین ترتیب ذرات ویروسی جدید تولید شد. رده سلولی AGS با ویروس Ad5(wt) و Ad5TATE(wt) آلوده شدند و در زمانهای مختلف، بروز اثرات تخریب سلولی در این سلولها بررسی شد. با استفاده از آزمونMTT، میزان بقای سلولی در رده سلولی AGS تیمار شده با ویروس نوترکیب بررسی گردید.
یافته ها: اثرات تخریب سلولی(CPE) در کمتر از 18 ساعت شروع و 72 ساعت بعد از آلودگی کامل گردید. تیتر ویروسهای نوترکیب با روش TCID50 برابر107 (برای Lµ 100 از محلول ویروسی) محاسبه شد. همچنین تیتر ویروس Ad5TATE(ΔE1,ΔE3) با روش TCID50 برابر TCID50/ml 107 بود. نتایج نشانداد، Ad5TATE(wt) در مقایسه باAd5(wt) ، توانایی آلوده‌سازی سلولهای رده AGS را دارد. نتایج حاصل از آزمون MTT نشان داد، با افزایش غلظت ذرات ویروسی و زمان نگهداری، تعداد سلولهای زنده AGS به‌طور قابل‌ملاحظه‌ای کاهش یافت.
نتیجه گیری: یافتههای این پژوهش نشان داد، ویروس نوترکیبAd5TATE(wt) قادر است به صورت اختصاصی سلولهای سرطانی رده سلولی آدنوکارسینوما معده (AGS) را آلوده و پس از تکثیر، آن ها را متلاشی کند. لذا میتوان از ویروس Ad5TATE(wt) به‌عنوان عامل انکولیتیک علیه سلولهای سرطانی رده سلولی آدنوکارسینوما معده(AGS) استفاده کرد.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
فیزیولوژی
دریافت: 1402/11/15 | پذیرش: 1402/10/1 | انتشار: 1402/10/1
دریافت: 1402/11/15 | پذیرش: 1402/10/1 | انتشار: 1402/10/1
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |