زمینه و هدف: ویبریو کلرا ((Vibrio cholerae باکتریِ گرممنفی عاملِ بیماریِ وباست که از طریقِ تولیدِ توکسینِ کلرا باعث اسهالِ شدید و کمآبی میشود. تشخیصِ سریع و دقیقِ این توکسین برای کنترلِ بیماری ضروری است. این مطالعه با تولیدِ آنتیبادیهای اختصاصی از موش و خرگوش، روشی سریع، دقیق و مقرونبهصرفه برای تشخیص ویبریو کلرا با استفاده از تکنیک اِلایزا ارائه میدهد.
مواد و روشها: ژن نوترکیب CtxB با استفاده از IPTG در E.coli BL21 (DE3) بیان و با وسترنبلات تأیید شد. پروتئینِ rCtxB خالصشده بهصورت زیرجلدی به خرگوش و موش تزریق شد. آنتیبادیها جدا و تخلیص شدند، سپس حساسیتِ آنتیبادیِ خالصشده با تکنیک اِلایزای ساندویچ و ارزیابیِ اختصاصیتِ آن، با تکنیک اِلایزای غیرمستقیم با استفاده از توکسینهای مشابه انجام شد.
نتایج: در این مطالعه، آنتیبادیهای استخراج و تخلیصشده از سرمِ موش و خرگوش در تکنیک اِلایزا مورداستفاده قرار گرفتند. نتایجِ جذبِ نوری نشان داد که آنتیبادیهای تولیدشده قادر به شناساییِ اختصاصیِ توکسینِ CtxB هستند. میزان حساسیتِ بالای این روش (شناساییِ میزانِ ۸ نانوگرمِ توکسین) و حداقل واکنشِ متقاطع با توکسینهای مشابه StxB وLtB ، بیانگر اختصاصیتِ مناسبِ آنتیبادیها میباشد.
نتیجهگیری: تکنیک اِلایزا مبتنیبر پروتئین و آنتیبادی روشی سریع، دقیق و مقرونبهصرفه برای شناساییِ ویبریو کلرا نسبت به روشهای کشتِ میکروبی یا مولکولیِ پیشرفته محسوب میشود. این روش با حساسیتِ بالا، اختصاصیتِ مناسب و عدمنیاز به تجهیزاتِ پیشرفتۀ آزمایشگاهی، امکانِ تشخیصِ سریعِ توکسینِ کلرا را در نمونههای بالینی و محیطی فراهم میکند.
| بازنشر اطلاعات | |
|
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |