دوره 16، شماره 62 - ( 3-1405 )
جلد 16 شماره 62 صفحات 35-23 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Hassanifard M, Olad G, Amani J. Identification of B subunit of Cholera Toxin Using ELISA Technique |. NCMBJ 2026; 16 (62) :23-35
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1812-fa.html
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1812-fa.html
حسنی فرد محبوبه، اولاد غلامرضا، امانی جعفر. شناسایی زیرواحد B توکسین کلرا با استفاده از تکنیک اِلایزا|. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1405; 16 (62) :23-35
مرکز تحقیقات میکروبیولوژیِ کاربردی، پژوهشکدۀ فناوریهای زیستپزشکی، دانشگاه علومپزشکی بقیهالله (عج)، تهران، ایران
چکیده: (17 مشاهده)
زمینه و هدف: ویبریو کلرا (Vibrio cholerae) باکتریِ گرممنفی عاملِ بیماریِ وباست که از طریقِ تولیدِ توکسینِ کلرا باعث اسهالِ شدید و کمآبی میشود. تشخیصِ سریع و دقیقِ این توکسین برای کنترلِ بیماری ضروری است. این مطالعه با تولیدِ آنتیبادیهای اختصاصی از موش و خرگوش، روشی سریع، دقیق و مقرونبهصرفه برای تشخیص ویبریو کلرا با استفاده از تکنیک اِلایزا ارائه میدهد.
مواد و روشها: ژن نوترکیب CtxB با استفاده از IPTG در E.coli BL21 (DE3) بیان و با وسترنبلات تأیید شد. پروتئینِ rCtxB خالصشده بهصورت زیرجلدی به خرگوش و موش تزریق شد. آنتیبادیها جدا و تخلیص شدند، سپس حساسیتِ آنتیبادیِ خالصشده با تکنیک اِلایزای ساندویچ و ارزیابیِ اختصاصیتِ آن، با تکنیک اِلایزای غیرمستقیم با استفاده از توکسینهای مشابه انجام شد.
نتایج: در این مطالعه، آنتیبادیهای استخراج و تخلیصشده از سرمِ موش و خرگوش در تکنیک اِلایزا مورداستفاده قرار گرفتند. نتایجِ جذبِ نوری نشان داد که آنتیبادیهای تولیدشده قادر به شناساییِ اختصاصیِ توکسینِ CtxB هستند. میزان حساسیتِ بالای این روش (شناساییِ میزانِ ۸ نانوگرمِ توکسین) و حداقل واکنشِ متقاطع با توکسینهای مشابه StxB وLtB ، بیانگر اختصاصیتِ مناسبِ آنتیبادیها میباشد.
نتیجهگیری: تکنیک اِلایزا مبتنیبر پروتئین و آنتیبادی روشی سریع، دقیق و مقرونبهصرفه برای شناساییِ ویبریو کلرا نسبت به روشهای کشتِ میکروبی یا مولکولیِ پیشرفته محسوب میشود. این روش با حساسیتِ بالا، اختصاصیتِ مناسب و عدمنیاز به تجهیزاتِ پیشرفتۀ آزمایشگاهی، امکانِ تشخیصِ سریعِ توکسینِ کلرا را در نمونههای بالینی و محیطی فراهم میکند.
مواد و روشها: ژن نوترکیب CtxB با استفاده از IPTG در E.coli BL21 (DE3) بیان و با وسترنبلات تأیید شد. پروتئینِ rCtxB خالصشده بهصورت زیرجلدی به خرگوش و موش تزریق شد. آنتیبادیها جدا و تخلیص شدند، سپس حساسیتِ آنتیبادیِ خالصشده با تکنیک اِلایزای ساندویچ و ارزیابیِ اختصاصیتِ آن، با تکنیک اِلایزای غیرمستقیم با استفاده از توکسینهای مشابه انجام شد.
نتایج: در این مطالعه، آنتیبادیهای استخراج و تخلیصشده از سرمِ موش و خرگوش در تکنیک اِلایزا مورداستفاده قرار گرفتند. نتایجِ جذبِ نوری نشان داد که آنتیبادیهای تولیدشده قادر به شناساییِ اختصاصیِ توکسینِ CtxB هستند. میزان حساسیتِ بالای این روش (شناساییِ میزانِ ۸ نانوگرمِ توکسین) و حداقل واکنشِ متقاطع با توکسینهای مشابه StxB وLtB ، بیانگر اختصاصیتِ مناسبِ آنتیبادیها میباشد.
نتیجهگیری: تکنیک اِلایزا مبتنیبر پروتئین و آنتیبادی روشی سریع، دقیق و مقرونبهصرفه برای شناساییِ ویبریو کلرا نسبت به روشهای کشتِ میکروبی یا مولکولیِ پیشرفته محسوب میشود. این روش با حساسیتِ بالا، اختصاصیتِ مناسب و عدمنیاز به تجهیزاتِ پیشرفتۀ آزمایشگاهی، امکانِ تشخیصِ سریعِ توکسینِ کلرا را در نمونههای بالینی و محیطی فراهم میکند.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
ژنتیک
دریافت: 1405/3/18 | پذیرش: 1405/3/10 | انتشار: 1405/3/10
دریافت: 1405/3/18 | پذیرش: 1405/3/10 | انتشار: 1405/3/10
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
