[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 9، شماره 34 - ( 1-1398 ) ::
جلد 9 شماره 34 صفحات 23-30 برگشت به فهرست نسخه ها
بهینه سازی بیان و تخلیص آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری هالوترموتولرانت Bacillus licheniformis SL-1
صبا بابکان، اعظم صفری، رضوان منیری، مریم حمزه میوه رود، سیاوش دستمالچی
1. دانشکده فنی مهندسی 2، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تبریز
چکیده:   (569 مشاهده)
سابقه و هدف: آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز (EC 3.4.21.19) متعلق­به خانواده‌ سرین پروتئازها است. این آنزیم می­تواند با هیدرولیز اختصاصی پیوندهای پپتیدی در آنالیز ساختار پروتئین، سنتز پپتیدها به روش فاز جامد و تهیه نانوتیوب­ها مورد استفاده قرار گیرد. هدف از این مطالعه تولید آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز باکتری Bacillus licheniformis SL-1 مقاوم­به حرارت که بومی ایران است است.
مواد و روش­ها: در این مطالعه بیان آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری Bacillus licheniformis SL-1 در E. coli BL21 i به­صورت پری­پلاسمی در دماهای ۱۶، ۲۰ و ۳۷ درجه سانتی­گراد و غلظت­های 4/0، ۱ و ۲ میلی­مولار القاگر بهینه سازی شد. با توجه­به این­که آنزیم نوترکیب تولید شده دارای دنباله هیستیدینی (His-tag) است از ستون نیکل سفارز برای تخلیص به روش کروماتوگرافی تمایلی استفاده گردید.
یافته­ ها: شرایط مختلف برای بیان آنزیم نوترکیب گلوتامات اندوپپتیداز بررسی گردید و بهترین نتایج برای بیان پری پلاسمیک و محلول آنزیم در میزبان E. coli BL21 در دمای ۳۷ درجه سانتی­گراد با غلظت ۲ میلی­مولار IPTG به­دست آمد.
نتیجه­ گیری: بررسی کیفی نتایج حاصل از بیان آنزیم تحت شرایط مختلف حاکی از آن­ست­که بیان پروتئین نوترکیب وابسته­به دما بوده و نیازمند غلظت­های بالای القاگرIPTG  است. مطالعه حاضر نتایج اولیه بررسی امکان تولید نوترکیب آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز در سیستم بیانی E. coli BL21 است. برای تولید هر چه بهتر آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز سایر پارامترهای مؤثر مانند سیستم­های بیانی و روش­های تخلیص جایگزین قابل بررسی و بهینه سازی است. 
 
واژه‌های کلیدی: گلوتامات اندوپپتیداز، بیان پری پلاسمی، باکتری B. licheniformis SL-1
متن کامل [PDF 447 kb]   (133 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله تحقیقی | موضوع مقاله: سلولی و مولکولی
دریافت: ۱۳۹۷/۱۲/۲۵ | پذیرش: ۱۳۹۷/۱۲/۲۵ | انتشار: ۱۳۹۷/۱۲/۲۵
ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Babakan S, Safary A, Moniri R, Hamzeh-Mivehroud M, Dastmalchi S. Expression Optimization and Purification of Glutamate Endopeptidase from halo-thermo tolerant Bacillus licheniformis SL-1. NCMBJ. 2019; 9 (34) :23-30
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1184-fa.html

بابکان صبا، صفری اعظم، منیری رضوان، حمزه میوه رود مریم، دستمالچی سیاوش. بهینه سازی بیان و تخلیص آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری هالوترموتولرانت Bacillus licheniformis SL-1 . مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1398; 9 (34) :23-30

URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1184-fa.html



دوره 9، شماره 34 - ( 1-1398 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی New Cellular and Molecular Biotechnology Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 3897