دوره 15، شماره 60 - ( 9-1404 )
جلد 15 شماره 60 صفحات 92-79 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Yahyaei S, Akhavan Sepahi A, Amani J, Hatef Salmanian A. Cloning and expression of alkaline protease gene from Bacillus strain isolated from hot spring samples of Tehran and Alborz provinces. NCMBJ 2025; 15 (60) :79-92
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1786-fa.html
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1786-fa.html
یحیایی سکینه، اخوان سپهی عباس، امانی جعفر، هاتف سلمانیان علی. همسانهسازی و بیانژن آلکالین پروتئاز قلیایی از سویۀ باسیلوس جداسازیشده از نمونههای چشمههای آب گرم استانهای تهران و البرز. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1404; 15 (60) :79-92
3. گروه زیست فراوردههای گیاهی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، پژوهشکده زیست فناوری کشاورزی، تهران، ایران
چکیده: (9 مشاهده)
سابقه و هدف: آنزیمهای پروتئاز با کاربردهای وسیع در صنایع گوناگون بخش عمدهای از بازار جهانی آنزیمها را به خود اختصاص دادهاند. گونه های مختلف باکتری، این آنزیمها را تولید میکنند. دراینمیان، پروتئازهایی که بتوانند در شرایط سخت مانند دما و pH بالا فعال باشند، موردتوجه محققان قرار گرفتهاند. این مطالعه با هدف شناساییِ سویههای مولّد پروتئازها از منابع موجود در شرایط محیطیِ سخت، مانند چشمههای آب گرم انجام گرفته است.
مواد و روشها: در این مطالعه بعد از غربالگری باکتریهای جداشده از نمونههای خاک و آب چشمههای آب گرم، براساس آنالیز مولکولی 16S rDNA یک سویه از جنس باسیلوس شناسایی شد. پس از تأیید وجود ژن سوبتیلیسین مولد پروتئاز قلیایی در این سویه منتخب، با کمک تکنیک PCR، این ژن جداسازی شده و در ناقل بیانی pET28a همسانهسازی شد. بعد از تأیید صحت همسانهسازی، بهینهسازی تولید این پروتئین نوترکیب با القای IPTG بررسی شد.
یافته ها: نتایج این بررسی نشان داد سویۀ منتخب بیشترین قرابت فیلوژنتیکی را با باسیلوس پومیلوس و باسیلوس سافنسیس دارد. بعد از ساخت ناقلِ بیانی، بیشترین مقادیر بیان پروتئاز نوترکیب در دمای 37 درجۀ سانتیگراد و طی 4 ساعت بعد از القای با IPTG یک میلیمولار به دست آمد. تأیید بیان پروتئین نوترکیب بهواسطۀ حضور باند 33 کیلودالتونی در آنالیز وسترن بلات مشخص شد.
نتیجه گیری: نتایج این مطالعه مشخص نمود که سویۀ منتخب جداسازیشده از نمونۀ چشمه های آب گرم با دارا بودن ژن مولّد پروتئاز قلیایی، پتانسیل بالقوّهای برای کاربرد در صنایع مختلف دارد.
مواد و روشها: در این مطالعه بعد از غربالگری باکتریهای جداشده از نمونههای خاک و آب چشمههای آب گرم، براساس آنالیز مولکولی 16S rDNA یک سویه از جنس باسیلوس شناسایی شد. پس از تأیید وجود ژن سوبتیلیسین مولد پروتئاز قلیایی در این سویه منتخب، با کمک تکنیک PCR، این ژن جداسازی شده و در ناقل بیانی pET28a همسانهسازی شد. بعد از تأیید صحت همسانهسازی، بهینهسازی تولید این پروتئین نوترکیب با القای IPTG بررسی شد.
یافته ها: نتایج این بررسی نشان داد سویۀ منتخب بیشترین قرابت فیلوژنتیکی را با باسیلوس پومیلوس و باسیلوس سافنسیس دارد. بعد از ساخت ناقلِ بیانی، بیشترین مقادیر بیان پروتئاز نوترکیب در دمای 37 درجۀ سانتیگراد و طی 4 ساعت بعد از القای با IPTG یک میلیمولار به دست آمد. تأیید بیان پروتئین نوترکیب بهواسطۀ حضور باند 33 کیلودالتونی در آنالیز وسترن بلات مشخص شد.
نتیجه گیری: نتایج این مطالعه مشخص نمود که سویۀ منتخب جداسازیشده از نمونۀ چشمه های آب گرم با دارا بودن ژن مولّد پروتئاز قلیایی، پتانسیل بالقوّهای برای کاربرد در صنایع مختلف دارد.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
میکروبیولوژی
دریافت: 1404/9/29 | پذیرش: 1404/9/10 | انتشار: 1404/9/10
دریافت: 1404/9/29 | پذیرش: 1404/9/10 | انتشار: 1404/9/10
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
