[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 4، شماره 16 - ( 9-1393 ) ::
جلد 4 شماره 16 صفحات 61-66 برگشت به فهرست نسخه ها
کلون کردن ژن آنزیم L-آسپاراژیناز Escherichia coli ΙΙ در Bacillus subtilis
حمید حسینیان ، بهار برزمینی
1. دانشگاه آزاد اسلامی واحد دامغان ، hamid.hos83@yahoo.com
چکیده:   (4343 مشاهده)
سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز ΙΙ کاربرد موثری در درمان لوسمی لنفوبلاستیک (ALL) دارد. این آنزیم از منابع باکتریایی جدا شده و به صورت تجاری به عنوان داروی ضدسرطان عرضه می شود. سلول های سرطانی برخلاف سلول های نرمال، نیاز شدیدی به ال-آسپاراژین دارند، در صورت به کارگیری ال-آسپاراژیناز  (E.C. 3.5.1.1) ال-آسپاراژین به ال-آسپارتات و آمونیوم تبدیل می شود که در نهایت به تخریب سلول های سرطانی منجر می شود. هدف از این پژوهش، کلون کردن ژن ال-آسپاراژیناز E. coli II در B. subtilis جهت تولید انبوه این آنزیم انجام گرفت.
مواد و روش ها: ژن ال-آسپاراژیناز  ansB) II) با روش PCR از E. coli BL21 جدا گردید. قطعه تکثیر یافته و شاتل وکتور بیانی pMR12 توسط آنزیم های HindΙΙΙ، BamHΙ هضم شد. واکنش اتصال بین قطعه PCR و شاتل وکتور بیانی برش خورده با روش استاندارد انجام گرفت. در مرحله بعد، وکتور نوترکیب با روش شوک با CaCl2 سرد بهE. coli JM101 ترانسفورم شد. در نهایت به میزبان B. subtilis با روش شیمیایی انتقال یافت.
یافته ها: در این مطالعه، ژن ansB به وسیله PCR از E. coli BL21 جدا و توسط تجزیه و تحلیل آنزیمی محصول PCR تایید گردید و در شاتل وکتور بیانی pMR12 کلون شد. سپس وکتور نوترکیب ابتدا در E. coli کلون گردید و وجود ژن 1047bp با تجزیه و تحلیل آنزیمی و واکنش PCR تایید شد به دنبال آن داخل B. subtilis کلون شد و استخراج پلاسمید انجام گرفت و با باند شاتل وکتور بیانی pMR12 دارای ژن ansB به صورت صحیح، مقایسه و تایید گردید.
نتیجه گیری: در این تحقیق با استفاده از شاتل وکتور بیانی pMR12 توانستیم ژن ansB را در B. subtilis کلون کنیم. این مطالعه، اولین گزارش کلونینگ ژن ansB در B. subtilis است.
واژه‌های کلیدی: ال-آسپاراژیناز ΙΙ، کلونینگ، pMR12، E. coli، B. subtilis
متن کامل [PDF 325 kb]   (1556 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله تحقیقی | موضوع مقاله: میکروبیولوژی
دریافت: ۱۳۹۲/۵/۲۳ | پذیرش: ۱۳۹۳/۴/۲۳ | انتشار: ۱۳۹۳/۱۰/۶
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

hoseinian H, barzaminy B. Study and Evolution Cloning of the Gene Encoding the L-AsparaginaseΙΙ from E. coli in B. subtilis . NCMBJ. 2014; 4 (16) :61-66
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-373-fa.html

حسینیان حمید، برزمینی بهار. کلون کردن ژن آنزیم L-آسپاراژیناز Escherichia coli ΙΙ در Bacillus subtilis. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1393; 4 (16) :61-66

URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-373-fa.html



دوره 4، شماره 16 - ( 9-1393 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی New Cellular and Molecular Biotechnology Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.08 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3781