[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 3، شماره 9 - ( 11-1391 ) ::
جلد 3 شماره 9 صفحات 75-83 برگشت به فهرست نسخه ها
کلونینگ آنزیم فیتاز پنیوفورا لایسی حاوی برچسب‌ هیستیدین در مخمر
محمدتقی برجیان بروجنی ، سید امید رعنایی سیادت، شیرین یوسفیان، فرناز نیکزاد جمنانی
کارشناس ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، آزمایشگاه نانوبیوتکنولوژی، گروه بیوتکنولوژی، دانشکده‌ی مهندسی انرژی و فناوری‌های نوین، دانشگاه شهید‌بهشتی، تهران، ایران ، mtborjian@gmail.com
چکیده:   (17257 مشاهده)

سابقه و هدف: فیتیک‌اسید، یکی از ترکیبات معدنی بسیار مهمی است که در درون گیاهان ذخیره‌ می‌شود. فیتاز ( E.C. 3.1.3.8 یا E.C. 3.1.3.26 ) به صورت گسترده‌ای به عنوان یک افزودنی جهت افزایش جذب فسفر و سایر عناصر در حیوانات تک‌معده‌ای به غذای آنها اضافه شده و بدین ترتیب سبب کاهش دفع فسفات به داخل محیط می‌گردد. در این تحقیق، کلونینگ و افزودن برچسب شش آمینواسیدی هیستیدین به ژن نوترکیب فیتاز در باکتری اشرشیا‌کلی و سپس مخمر، به منظور خالص‌سازی آنزیم تولید شده در مقادیر بالا در این میزبان، انجام شد.

مواد و روش‌ها: توالی پروتئینی آنزیم فیتاز قارچ P. lycii از بانک های اطلاعاتی پروتئین استخراج شده و با توجه به ترجیح کدنی مخمر ، توالی ژن طراحی و سنتز گردید. با طراحی پرایمرهای مناسب توالی حاوی شش هیستیدین به ژن مورد نظر داخل حامل دوگانه­ی pFPMTMF 14α'> اضافه شده و در نهایت با استفاده از الکتروپوریشن به داخل مخمر انتقال یافت.

یافته‌ها: سازه‌ی نوترکیب حاوی ژن فیتاز به همراه برچسب شش آمینواسیدی هیستیدین تولید شد. حضور ژن در داخل باکتری و مخمر با استفاده از روش‌های هضم آنزیمی و PCR تایید گردید.

نتیجه­گیری: کلونینگ موفق ژن فیتاز قارچی حاوی برچسب شش هیستیدین، در باکتری اشرشیاکلی و مخمر به منظور بیان بالا و سپس خالص سازی این آنزیم، انجام شد.

واژه‌های کلیدی: فیتیک‌اسید، فیتاز، برچسب هیستیدین، کلونینگ و مخمر
متن کامل [PDF 629 kb]   (2591 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله تحقیقی | موضوع مقاله: سلولی و مولکولی
دریافت: ۱۳۹۱/۱۱/۲۸
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

کد امنیتی را در کادر بنویسید >


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Borjian Borujeni M, Ranaei Siadat S O, Yousefian S, nikzad jamnani F. Cloning of gene encoding phytase included hexahistidine-tag from the Peniophora lycii in yeast. NCMBJ. 2013; 3 (9) :75-83
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-290-fa.html

برجیان بروجنی محمدتقی، رعنایی سیادت سید امید، یوسفیان شیرین، نیکزاد جمنانی فرناز. کلونینگ آنزیم فیتاز پنیوفورا لایسی حاوی برچسب‌ هیستیدین در مخمر. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1391; 3 (9) :75-83

URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-290-fa.html



دوره 3، شماره 9 - ( 11-1391 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی New Cellular and Molecular Biotechnology Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3638