[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 3، شماره 9 - ( 11-1391 ) ::
جلد 3 شماره 9 صفحات 37-59 برگشت به فهرست نسخه ها
مقایسه روش‌های مختلف (میکروبی، آنزیمی‌ومولکولی) تشخیص آلودگی مایکوپلاسمایی در رده های سلولی انسانی و حیوانی ذخیره شده در بانک سلولی انستیتو پاستور ایران
وحید ملا کاظمی ها، رضا مهدیان، آرش معمارنژادیان، محمد علی شکر گزار، حمیدرضا مهاجرانی، امیر امان زاده، شهرام آذری
دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات اراک،اراک-ایران ، vmkazemi@yahoo.com
چکیده:   (22669 مشاهده)

اهداف و سابقه: آلودگی مایکوپلاسما در کشت‌ سلول از مشکلات جدی در تولید فرآورده‌های بیولوژیک محسوب می‌شود. هدف ما در این پژوهش انتخاب بهترین روش استاندارد به عنوان روشی سریع با حساسیت و اختصاصیت و دقت بالا برای تشخیص آلودگی مایکوپلاسما در کشت های سلولی بانک سلولی ایران می‌باشد.

مواد و روش‌ها: در این پژوهش40 رده‌ی سلولی مشکوک به آلودگی مایکوپلاسما توسط سه روش کشت میکروبی، آنزیمی و مولکولی مورد مطالعه واقع گردیدند. ارزیابی آنزیمی به کمک کیت mycoalert انجام شد و در روش مولکولی از پرایمر یونیورسال طراحی شده بر مبنای سکانس‌های ثابت و مشترک موجود در SrRNA 16 ریبوزومی استفاده گردید.

یافته‌ها: درصد آلودگی مایکوپلاسمایی در کشت‌های سلولی با روش‌های مولکولی، آنزیمی و میکروبی به ترتیب با 5/57% و 5/52% و 40% استحصال گردید.نتایج حکایت از تایید حساسیت، ویژگی و صحت(دقت) بالای ارزیابی مولکولی واکنش‌های زنجیره‌ای پلیمراز ( PCR ) در مقایسه با دو روش آنزیمی و کشت میکروبی دارد.

نتیجه‌گیری: سنجش PCR بر مبنای سکانس‌های ثابت و مشترک موجود در SrRNA 16 ری بوزومی، تکنیکی ارزشمند ، مفید و قابل اعتماد با حساسیت ، اختصاصیت و دقت بالا جهت شناسایی آلودگی‌های مایکوپلاسمایی در کشت‌های سلولی و سایر فرآورده‌های بیولوژیک می باشد. تکنیک آنزیمی mycoalert با توجه به حساسیت ،ویژگی و سرعت بالای آن در تشخیص آلودگی مایکوپلاسمایی (کمتر از 20 دقیقه) بعد از PCR ، می‌تواند جایگزین روش های‌ کشت میکروبی و رنگ آمیزی DNA فلوئوروکروم گردد.

واژه‌های کلیدی: کشت سلولی، آلودگی مایکوپلاسمایی، رده‌های سلولی انسانی- حیوانی
متن کامل [PDF 879 kb]   (6660 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله تحقیقی | موضوع مقاله: میکروبیولوژی
دریافت: ۱۳۹۱/۱۱/۲۸
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Molla Kazemiha V, Mahdian R, Memarnejadian A, Shokrgozar M A, Mohajerani H R, Amanzadeh A et al . Comparison of different methods (microbial culture, enzymatic and molecular) for the detection of mycoplasma contamination in human and animal cell lines, preserved in a National Cell Bank of Pasteur Institute of Iran. NCMBJ. 2013; 3 (9) :37-59
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-287-fa.html

ملا کاظمی ها وحید، مهدیان رضا، معمارنژادیان آرش، شکر گزار محمد علی، مهاجرانی حمیدرضا، امان زاده امیر و همکاران.. مقایسه روش‌های مختلف (میکروبی، آنزیمی‌ومولکولی) تشخیص آلودگی مایکوپلاسمایی در رده های سلولی انسانی و حیوانی ذخیره شده در بانک سلولی انستیتو پاستور ایران. مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1391; 3 (9) :37-59

URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-287-fa.html



دوره 3، شماره 9 - ( 11-1391 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی New Cellular and Molecular Biotechnology Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 3921