دوره 16، شماره 62 - ( 3-1405 )
جلد 16 شماره 62 صفحات 48-36 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Rahmani N, Norouzian D, Tabatabaee Bafroee A S. Comparison of the Effects of Different Master Mixes on the Efficiency of Real-time PCR Technique in Diagnosing Human Papillomavirus (HPV). NCMBJ 2026; 16 (62) :36-48
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1818-fa.html
URL: http://ncmbjpiau.ir/article-1-1818-fa.html
رحمانی نسیم، نوروزیان داریوش، طباطبایی بفرویی اکرم سادات. مقایسۀ تأثیر مسترمیکسهای مختلف بر کاراییِ تکنیکِ Real-time PCR در تشخیصِ ویروسِ پاپیلومای انسانی (HPV). مجله تازه هاي بيوتكنولوژي سلولي و مولكولي. 1405; 16 (62) :36-48
مؤسسۀ نسیم، آزمایشگاهِ قطبِ ژنومیکسِ پارکِ فناوریِ سلامت، دانشگاه علومپزشکیِ شهید بهشتی، تهران، ایران
چکیده: (32 مشاهده)
زمینه و هدف: آگاهی از ژنوتایپهای ویروسِ پاپیلومای انسانی (HPV) برای مدیریتِ درمان و پیشگیری از رشد و تقسیمِ سلولیِ غیرطبیعی و سرطانِ دهانۀ رحم بسیار مهم است. ویروسِ HPV بیش از 200 ژنوتایپ دارد که حدودِ 40 نوع آن باعث عفونتِ دستگاهِ تناسلی میشود. شیوعِ جهانیِ HPV در مناطقِ مختلف، بین 2/1 تا 6/25 درصد گزارش شده است.
مواد و روشها: در این مطالعۀ توصیفی-آزمایشگاهی، 58 نمونۀ بالینی از زنانِ مراجعهکننده به بیمارستانِ میلادِ تهران با علائمِ واژنیت جمعآوری شد. حضورِ ژنوتایپِ HPV-6 با استفاده از روشِ Real-time PCR و پرایمرهای اختصاصی بررسی گردید. بهمنظورِ بهینهسازیِ واکنش، چهار ترکیبِ متفاوتِ مسترمیکس شامل مقادیرِ مختلفِ Tris HCl، KCl و MgCl2 طراحی و عملکردِ آنها در تشخیصِ HPV-6 مقایسه شد.
نتایج: از مجموعِ 58 نمونه، 8 نمونه (79/13 درصد) مثبت برای HPV-6 گزارش شدند. نتایج نشان دادند که مسترمیکسِ حاوی Tris-HCl 10 mM، KCl 50 mM و MgCl2 2 mM بهترین عملکرد را از نظرِ حساسیت و اختصاصیت داشتند و نیز مقادیرِ Ct پایینتری در این گروه مشاهده شد. منحنیِ ذوبِ محصولاتِ PCR اختصاصیتِ واکنش را تأیید کرد و عدموجودِ پرایمر دایمر و محصولاتِ غیراختصاصی را نشان داد.
مواد و روشها: در این مطالعۀ توصیفی-آزمایشگاهی، 58 نمونۀ بالینی از زنانِ مراجعهکننده به بیمارستانِ میلادِ تهران با علائمِ واژنیت جمعآوری شد. حضورِ ژنوتایپِ HPV-6 با استفاده از روشِ Real-time PCR و پرایمرهای اختصاصی بررسی گردید. بهمنظورِ بهینهسازیِ واکنش، چهار ترکیبِ متفاوتِ مسترمیکس شامل مقادیرِ مختلفِ Tris HCl، KCl و MgCl2 طراحی و عملکردِ آنها در تشخیصِ HPV-6 مقایسه شد.
نتایج: از مجموعِ 58 نمونه، 8 نمونه (79/13 درصد) مثبت برای HPV-6 گزارش شدند. نتایج نشان دادند که مسترمیکسِ حاوی Tris-HCl 10 mM، KCl 50 mM و MgCl2 2 mM بهترین عملکرد را از نظرِ حساسیت و اختصاصیت داشتند و نیز مقادیرِ Ct پایینتری در این گروه مشاهده شد. منحنیِ ذوبِ محصولاتِ PCR اختصاصیتِ واکنش را تأیید کرد و عدموجودِ پرایمر دایمر و محصولاتِ غیراختصاصی را نشان داد.
نتیجهگیری: بهینهسازیِ ترکیبهای مسترمیکس در روشِ Real-time PCR میتواند حساسیت و دقتِ تشخیصِ HPV-6 را افزایش دهد و روشی کارآمدتر و مقرونبهصرفهتر برای تشخیصِ این ژنوتایپ ارائه نماید. این رویکرد میتواند به توسعۀ کیتهای تشخیصیِ مؤثرتر کمک کرده و مشارکتِ بیماران در برنامههای غربالگریِ HPV را افزایش دهد که در نهایت به پیشگیریِ بهتر از سرطانِ دهانۀ رحم منجر خواهد شد.
واژههای کلیدی: ویروسِ پاپیلومای انسانی (HPV)، Real-time PCR، مسترمیکس، PCR، تشخیصِ مولکولی، بهینهسازی
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
ژنتیک
دریافت: 1405/3/26 | پذیرش: 1405/3/10 | انتشار: 1405/3/10
دریافت: 1405/3/26 | پذیرش: 1405/3/10 | انتشار: 1405/3/10
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
